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Q:这个 BrdU 怎么用,需要 37℃加热吗?
A:需要 37℃加热
Q:冰冻切片的 BrdU 染色,不出结果,满片子都是非特异染色,胞浆着色?
A:可能是灌注时没有灌干净,红细胞留在组织里,最后就是掌握显色时间。
Q:用于动物和细胞上,然后一抗二抗染色无荧光信号?
A:封闭前需要使用2N盐酸处理1h,然后洗去盐酸,再加入等量的0.1M Na2B4O7 室温浸泡15min,洗去四硼酸钠。目的是:2N盐酸可以使DNA双链变性解开,暴露存在DNA双链中的抗原,即充分暴露BRDU; Na2B4O7 中和盐酸的酸化,若不进行中和会引起后期抗体效价下降,从而导致染色结果不好或者染不出来。
已发表文献
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[2] Cao Z, Xiao Q, Dai X, et al. circHIPK2-mediated σ-1R promotes endoplasmic reticulum stress in human pulmonary fibroblasts exposed to silica. Cell Death Dis. 2017;8(12):3212. Published 2017 Dec 13. doi:10.1038/s41419-017-0017-4(IF:5.965)
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