1g Ni-NTA填料能结合多少His标签蛋白？

1g小包装如果国内现货，国产一般3~7天，进口常见1~2周，但无现货或冷链/关务可能延到3~4周。这个规格我建议优先买国内有现货的原厂小包装或预装柱替代品，不要只看单价：1g填料还要配空柱、脱盐/再生试剂，综合成本未必低。若你只做三四次小规模，5 mL预装重力柱往往比1g干粉更省事，柱床体积固定，重复性更好。采购时确认填料保存条件（4℃还是常温）、能否常温运输，以及是否提供载量参考，避免买到分装无COA。

国产和进口1g小包装批次稳定性差异主要体现在三个方面：粒径均一性、Ni离子脱落率、保存液是否规范。进口主流品牌通常每批有较完整COA，柱床体积/载量波动相对小；国产分装或小厂有时干粉复水后柱床体积有差异，需要自己标定载量。建议不论品牌，收到后先用低浓度EDTA洗、再重新载Ni，用同一批His蛋白做一次载量测试。1g规格如果不是原厂密封小包装而是代理商分装，发黄、结块或漏液的概率会增加，到货先检查。

200 mL菌液裂解后一般得到10~30 mL可溶上清，蛋白量从不足1 mg到几十mg都有可能。判断1g够不够，别只看次数，要按“预计目标蛋白量/填料总载量”来算。小规模纯化三四次，如果每次目标蛋白在2~5 mg，1g可以支撑；如果单次超过10 mg，建议直接买5 mL预装柱或2~3g填料。另一个常被忽略的是Ni填料重复使用：只要做好再生和脱Ni/载Ni，1g规格用于同一种蛋白纯化可回收多次，但载量会逐次下降。

1g Ni-NTA琼脂糖干粉复水后通常能得到约3~4 mL匀浆，沉降后柱床体积大约在2~4 mL范围，小规模重力柱一般装1~2 mL就够。按常规Ni-NTA/IDA体系，结合载量经验值多在10~30 mg/mL柱床，取决于His标签暴露程度、蛋白分子量、流速和杂蛋白竞争。所以1g规格总结合量大致在几十mg级别。200 mL菌液如果目标蛋白可溶性高表达，一两次能拿到几mg到十几mg，1g做三四次小规模纯化比较吃紧但可行；表达很低就需要先优化表达或增加填料。