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质粒提取试剂盒有能适配自动核酸提取仪的吗?

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提问:研发小白2846 2026-03-28 浏览 182 4 个回答
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A
Assay 2026-09-14
不必非得用仪器配套试剂,但第一次最好用厂家配套试剂跑通,再换兼容磁珠试剂。配套试剂程序固定,换试剂可能出现磁珠沉降慢、结团或得率波动。96孔深孔板方案建议用2 ml方孔板,裂解和中和后离心力要够,否则粘稠裂解液会污染磁珠,纯度明显下降。单样品成本要看包装规格,小包装较贵,大包装折合下来低于柱提或接近柱提,但自动提取省人工。建议先拿8个样品小批量对比柱提,看A260/280和琼脂糖图。
D
DavidAntibody6166 2026-09-12
能不能上机首先看你那台96通道提取仪是开放程序还是封闭体系。开放型可以试市售磁珠法质粒提取试剂盒,但细菌质粒需要先碱裂解再磁珠结合,不能直接用基因组DNA或RNA程序。建议找试剂厂家要深孔板法质粒提取的protocol,按仪器加热、吸磁、混匀参数重编程序。菌液1-2 ml对质粒载量偏少,建议先离心富集到每孔1.5 ml左右,加溶菌酶/碱裂解后磁珠结合。得率接近离心柱水平有难度,PCR、酶切一般够用,转染要测内毒素。
冯
冯静勇4918 2026-09-09
质粒磁珠法提取与基因组/RNA磁珠法不同,关键在裂解和去蛋白。常规碱裂解后需要中和,形成大量蛋白-基因组沉淀,深孔板离心或过滤后才能加磁珠;如果仪器不带离心,要提前用96孔过滤板或深孔板离心机处理。磁珠结合条件要调整异丙醇或结合液比例,否则得率低。1-2 ml菌液建议用高拷贝质粒,产率大约每孔几微克,低拷贝可能不够。批量提取前先验证孔间均一性,做一个96孔板整板重复,测CV值。
S
Science 2026-09-20
如果你仪器是固定程序、非开放,可能没法直接上磁珠质粒试剂盒,但可以半自动:用深孔板做碱裂解和中和,磁珠结合/洗涤/洗脱用仪器,或者用多道移液器配合磁力架手工做。这样避免96个柱子的操作,但通量不如全自动。试剂选择上可问诺唯赞、天根、Thermo等有没有自动化质粒磁珠方案,他们有的提供仪器适配程序包。成本方面别只看单孔试剂价,还要算深孔板、磁棒套、过滤板等耗材,实际单样品可能比柱提高,但批量更划算。
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