IPTG配成1M母液后放-20能保存多久？

我们1M IPTG母液过滤除菌分装-20避光，一般用一年到一年半活性没见明显下降。两年没变黄没沉淀是好事，但不代表一定有效。IPTG水溶液长期存放可能缓慢降解或反复冻融导致局部浓度变化。建议这管先别用于关键诱导，拿同一批菌和质粒做小量对照：旧管与新配母液同浓度诱导，看目的条带，差异不大可继续用完。我习惯买粉末自配，成本低，即用型适合用量少。

如果你们诱导频繁，买粉末自配更灵活，每次配20-50 mL母液，分装-20。即用型溶液贵且开封后同样需注意效期，适合偶尔使用。关于两年旧管，不建议在没有验证的情况下使用。IPTG水溶液在-20保存一般稳定，但反复取用会造成冻融，建议分装200 μL/管，每管用一次。两年管如果外观正常，先做小量诱导，有条件可测OD600诱导曲线看是否有异常。

关键是避光、防反复冻融。配好后过滤除菌，用无菌EP管分装0.5-1 mL/管，-20保存。避光可以用棕色管或包铝箔，普通透明管放抽屉也行。放了两年如果没污染、没变黄、没沉淀，活性可能下降，但下降幅度不一定影响常规诱导。我们曾有放18个月的母液，做报告基因和目的蛋白诱导仍正常。不过不建议把两年旧管直接用于重要纯化批次，先做小试。如果母液出现浑浊、异味，直接弃。

可以做一次快速平行验证：同一批BL21(DE3)感受态，转化同一质粒，分三瓶分别加新配母液、旧管母液和无诱导对照，0.5 mM 37度3小时或16度过夜，SDS-PAGE看目的蛋白条带。若旧管目的带明显弱，说明效价低；如果差异不大，可以用完。长期保存建议每次分装成单次用量，避免整管反复冻融。即用型溶液通常标有效期，但开封后也要分装并记录开封日期。避光有好处，但更关键是避免污染。