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肿瘤组织芯片用于FISH探针验证稳定吗?

储存与运输
提问:试剂同学 2026-08-24 浏览 213 4 个回答
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N
Nina 2026-09-06
新探针验证不建议一上来就做整张大芯片,先拿1-2张包含阳性/阴性组织的小规格芯片或试用片,做蛋白酶K浓度、变性温度、洗涤强度梯度。TMA多个癌种在同一张片,消化条件要折中,某些组织可能过消化或消化不足,记录每种癌种信号和背景差异,必要时用同批普通切片平行验证。
彭
彭飞飞 2026-09-16
TMA掉片主要与玻片表面处理、烤片和杂交条件有关。即使供应商做了防脱处理,仍建议实验前再60-65°C烤片2-4小时,或按试剂盒推荐过夜,能明显减少变性步骤脱片。不要盲目提高烤片温度或时间过长,可能损伤DNA,造成信号减弱或背景升高。
B
BioLab7165 2026-08-18
市售肿瘤TMA多数为中性福尔马林固定石蜡包埋,切片厚度4-5μm,理论上适合FISH。但不同来源的固定时间、脱水程序会直接影响杂交效率和信号强度。购买前确认固定方式,避免使用含汞、苦味酸或重金属固定液的组织。有条件时索取该批组织的FISH质控示例,比如HER2在乳腺癌/胃癌或MET在肺癌的信号图。
K
KevinSample5539 2026-07-08
有些供应商会提供FISH兼容性质控数据或经验条件,但多数只能参考,不能代替自己验证。可以要求对方提供做过FISH的货号和探针类型;若没有现成数据,也至少确认切片使用正电荷或硅烷化防脱玻片。到货后先检查有无片落、组织折叠,若脱片率高,可尝试更换防脱片类型、延长烤片或降低变性温度。
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