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全部回答4
M
Mediaing6768
2026-08-16
从CellTiter-Glo切到国产,不要一把全换。建议用同一批细胞、同一化合物稀释板,平行跑进口和国产试剂,比较每块板的%抑制率或IC50排序,而不是绝对RLU。允许信号绝对值有差异,关注信噪比、孔间CV和最低可分辨细胞数。另外,激酶抑制剂筛选常用DMSO,需测试试剂对0.1%-0.5% DMSO的耐受性,DMSO浓度波动会影响发光读数。记得把培养基pH和酚红颜色差异纳入考虑,酚红可能干扰但一般发光法影响较小,可问厂家是否有适配无酚红培养基的数据。
B
Bio4683
2026-09-16
高通量每周100板,不能只看手动,建议在自动化液体工作站上验证:连续分液96孔或384孔,测整板CV。试剂粘度较高,注意分液管路残留或气泡,加样体积可调。国产试剂如果含有不同比例裂解/检测组分,最好选预混单组分或A/B组分,减少自动化步骤。半衰期要足够长,若你的读板顺序超过20-30分钟,选半衰期大于2小时的产品可减小边缘效应。50ml试用装通常够做10-20块96孔板,先用它做孔间均一性和读板时间窗口,再决定是否切换。
A
AndyFlask6624
2026-09-09
批间差不能只看COA,建议让厂家提供连续三个批次的样品或留样,用同一细胞板复测,计算各批RLU的CV和信背比。若批间RLU差在两倍以内且不影响化合物排序,一般可接受;如果绝对值波动大,建议在每批试剂使用前做细胞数-信号预实验校正。大包装一般500ml或1L装,单价低于小瓶,按你们每周100块96孔板用量,可估算月消耗量后谈年度锁价。货期多数国产1-3天冷链发货;进口分装有货期,注意保存温度不能反复冻融超过说明书次数。
W
Wendy2557
2026-09-19
国产发光法细胞活力试剂盒,先让供应商提供50ml试用装,你用它做一次梯度实验:HEK293和HepG2分别铺500、1000、2000、5000、10000、20000个细胞/孔,每种细胞数做6-8复孔,加药后按说明书裂解、读板。看两点:低细胞数是否在空白3倍SD以上可区分,高细胞数是否未超出信号上限而平台化。试剂线性范围至少要覆盖你实际筛选的细胞密度,若接近上限,可缩短读数时间或减少加样量。信号半衰期测法:加试剂后0.5、1、2、3小时分别读同一板,记录RLU衰减。
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