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大师小陈7281
2026-09-10
30-40ml细胞上清,如果只是Western和NTA,沉淀法可以用,但别直接拿沉淀去跑NTA,杂蛋白颗粒会抬高背景。我一般用PEG类沉淀后,PBS重悬再过0.22μm滤膜,NTA能干净不少。沉淀法回收率通常高一些,纯度不如膜亲和。杭州要这周到的,选有本地仓的代理商发顺丰,基本1-2天能到。预算单次80元内沉淀法够用,膜亲和可能超。下单前先和销售确认现货,别等调货。
A
AssayHub9247
2026-09-13
建议别一次直接买大盒。让厂家发小试用装,用同一批肿瘤细胞上清分三份:现有超离、沉淀法、膜亲和法平行提取。看总蛋白、CD63/TSG101、Calnexin阴性和NTA粒径/颗粒数比值。这样你能判断回收率够不够和杂蛋白多少,比单纯比价格有用。杭州很多试剂代理有现货,可以要求这周内到,试用装费用通常可抵后续正装,先问清楚。
T
TomElisa
2026-09-16
如果纯度优先,我更建议膜亲和或尺寸排阻,尤其你后续还要NTA。可以先取30ml上清,3000g去细胞碎片后用100kDa超滤管浓缩到5ml左右,再过膜亲和柱。这样回收率会低于沉淀法,但粒径分布和WB阴性对照更干净。单次成本要卡80元的话,国产小规格比较有机会,进口柱大概率超预算。供货方面让杭州代理发顺丰当天可出,到货很快。
T
Tubeer
2026-09-12
30ml上清用沉淀法最简单,但杂蛋白多,后续做WB得加纯化。
O
OscarTube8852
2026-08-05
推荐超滤浓缩再超离,30ml不算大,进口某S试剂盒也OK。
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