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全部回答3
C
Cell9436
2026-07-28
处理时我倾向低速离心而非0.22μm过滤。离心可用4℃、约500-1000×g、10分钟,取上清。0.22μm滤器会截留大分子聚集体、脂蛋白,可能还有部分细胞外囊泡,对原代细胞可能有影响,而且絮状物容易堵膜,过滤反而麻烦。离心后轻柔混匀,避免脂质分层。要保证离心管无菌,操作在安全柜内完成。
G
GenePro7840
2026-08-30
白色絮状沉淀不一定是变质。胎牛血清低温解冻时脂蛋白、纤维蛋白原或冷沉蛋白容易析出,摇晃不散也常见,尤其放置4℃过夜后。先看颜色是否明显加深、有无异味,如果血清本身清亮、仅少量絮状,通常可以继续用。对原代巨噬细胞敏感,不建议直接过滤后就用,最好先取混合后的上清做一次小规模贴壁或功能测试,确认与上一批无差异。
A
AssayHub1442
2026-08-05
对原代巨噬细胞来说,批次管理比沉淀本身更值得关注。建议同一瓶血清在分装前4℃化透,轻柔颠倒混匀,使成分尽量均匀,再分装并记录沉淀情况。若某一管已有明显沉淀,不要单独取上清使用,否则不同管之间可能有差异。分装后进行小规模原代细胞对比测试,看贴壁、形态和得率;如和上一批差异不大可继续用,如变化明显就只用于普通细胞系。
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