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全部回答5
蒋
蒋琳明
2026-09-23
大多数NK无血清基础培养基不含足量IL-2，或者浓度只维持短期，扩增中后期必须补。我们从第0天按500-1000 IU/mL加IL-2，每2-3天补液时按新加入体积补足浓度。IL-2活性和厂家差异大，最好认准重组人IL-2，标注国际单位，避免使用含载体蛋白的劣质品。
S
Sam9946
2026-08-31
补IL-2等因子时注意分装保存，IL-2反复冻融活性会下降，建议按一次用量分装-80度保存，用前4度融化。补液时先算好新加入体积，再加入对应因子，避免把因子直接滴到细胞表面。工作液配制用无菌PBS或培养基，过滤要看厂家说明，不要自行过0.22μm滤器，部分因子会吸附损失。
吴
吴敏明
2026-08-28
血清替代物不一定需要。无血清NK培养基通常已含白蛋白、转铁蛋白、胰岛素等，但有些人为了提升扩增会额外加自体血浆或血小板裂解物2-5%。这会引入批间差异，如果不是扩增特别差，不建议加。我们做过对比，加自体血浆的前期扩增快，但后期纯度下降，CD3-CD56+比例略低。
A
Antibodying
2026-09-07
5×10^6 PBMC起始量适合做小规模预实验，建议设几个因子梯度：IL-2单独500、1000 IU/mL；IL-2+IL-15；IL-2+IL-15+IL-21。接种密度1-2×10^6/ml，24孔板先试。每2天计数并补液，培养第14天前后看扩增倍数和CD56流式。100ml一般够做6-10孔，需避免反复开盖污染。
小
小小大姐
2026-09-02
说明书没写清楚时不要猜，直接找厂家技术支持要细胞因子添加方案。不同品牌差异大，有的培养基自带IL-2、IL-15、IL-18等，有的只用基础液，需要另配。100ml小包装常有，但货源看型号，下单前确认库存和效期。冷链运输一般3-7天到，夏天要求加冰袋和温度计。
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