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What is the appropriate proportion of animal serum to add to DMEM? Will slow delivery affect cell experiments?

Medical Devices
Asked by:李鹏琳 2026-06-30 Views 188 4 answers
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All Answers4
林
林学生 2026-09-10
国产替代可以考虑源培、依科赛、奥浦迈这些有 DMEM/DMEM F12 基础培养基的厂商,先让代理提供小包装试用,测 pH、内毒素和贴壁情况。不同国产批次也可能有波动,所以要 COA,最好同时用旧 DMEM/F12 做对照。缺货时也可以找同校平台或兄弟实验室调几瓶,优先保证组织能尽快处理,避免样品放久了变量更多。
K
Kevin1714 2026-09-03
组织冻在 -80℃ 再复苏分离细胞,活力通常会下降,尤其冻的是整块组织而不是分离后的细胞,支持细胞可能更明显。如果已经冻了,不要反复冻融,解冻要快速置 37℃ 水浴,尽快用温和酶消化,加 DNase I 防止死细胞黏连,接种密度可以比新鲜组织提高一些。等三周太不可控,我建议先借实验室的 DMEM/F12 或国产培养基推进预实验。
余
余娟2567 2026-09-11
普通 DMEM 养牛睾丸支持细胞,我会先按 10% FBS 做基础。如果贴壁慢或接种后头两天死亡细胞多,可以临时提高到 15%,但不要长期无目标地用高血清,可能引入更多激素和因子,影响支持细胞纯度。关键还是血清批次,建议同时试 2-3 个批次,用贴壁率、形态和传代后活力筛一批稳定的。10% 和 15% 最好同批血清做小瓶对比,而不是直接切换。
S
Science 2026-08-01
从 DMEM/F12 换成普通 DMEM 前,建议先做小批量平行,别直接全换。支持细胞对成分变化敏感,关注贴壁时间、形态铺展、是否出现空泡。普通 DMEM 和 DMEM/F12 的缓冲、氨基酸组成有差异,可能影响支持细胞功能。我们一般会保留部分原体系,换培养基后连续观察 2-3 天,若脱落或空泡明显就回退。没有数据前不要用主要实验样品冒险。
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