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Is it reliable to use Coomassie Brilliant Blue for measuring crude protein in chicken farm feed?

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Asked by:ProteinHub8367 2026-07-06 Views 229 4 answers
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唐
唐耗材 2026-09-05
自配的话需要考马斯亮蓝G250、95%乙醇、85%磷酸、牛血清白蛋白标准品、磷酸盐缓冲液或生理盐水,配制Bradford工作液;比色皿用普通玻璃或一次性塑料即可,波长595nm,不必石英。粉状饲料要粉碎、称样、提取、离心取上清,否则悬浮颗粒会干扰。单次试剂成本主要看标准品和工作液分摊,自配通常比成品低,但废液处理和人工也要算进去。成品试剂盒贵一点但配液误差小,适合非专业实验室。
L
LabMax6715 2026-08-03
考马斯亮蓝法测豆粕、玉米这类植物性饲料,我不太建议直接当作粗蛋白验收的准确定量。它测的主要是可溶性蛋白,染料结合受氨基酸组成影响,玉米醇溶蛋白、豆粕球蛋白响应差异大,多酚、色素、纤维素也可能干扰。月20来个样,如果只是想快速看批次稳定、筛异常样品,可以用;但要报粗蛋白含量,还是以凯氏定氮为基准。上马前先做同批次样品两种方法比对和加标回收,偏差可控再限范围使用,不然数据容易误导配方调整。
A
Antibodying7994 2026-08-02
非专业实验室建议选即用型Bradford试剂盒,最好带BSA标准品、说明书记录明确线性范围。选型重点:是否标了植物提取物或饲料样品的兼容性;显色后5-10分钟读数,注意线性上限。货期要问经销商有无现货,国产现货一般几天,进口常备货要一两周,偏远物流另算。到货后先做一次标准曲线、空白和质控样,不要直接大批量测。试剂盒储存注意避光、低温,工作液用前摇匀。
T
Tubeer4303 2026-08-25
操作上别把粉料直接丢染料里。建议统一提取方法,比如称样后用0.1N NaOH或尿素提取,离心取上清,同时做提取液空白,否则背景偏高。每批带一个已知蛋白含量的质控豆粕或玉米样,用凯氏定氮定过值的,与考马斯亮蓝结果比对,偏差超过15%就复测。显色后时间要一致,避免过久形成沉淀。月20个样,质控和标准曲线不能省。如果只做豆粕掺假初筛或分选,这个方法可做辅助;出数据要注明方法,不能等同于饲料粗蛋白。
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