Question Detail
When using Trizol to extract RNA from animal liver, the 260/230 ratio is only 1.2. Is this due to fat interference?
Lab Techniques
💡
How to Answer This Question
-
1
Read the Context
Read the full description, category and tags to understand the real scenario.
-
2
Give an Actionable Answer
Give concrete steps, cautions and reasoning — not just a conclusion.
-
3
Cite Sources
Reference standards, papers or product manuals to make the answer more credible.
-
4
Wait for Acceptance
You will be notified if accepted. Continue the discussion in comments.
All Answers4
K
Kevin
2026-09-11
如果电泳条带完整，260/230低可以先不纠结，看下游用途。做qPCR或建库前可以用柱式RNA Cleanup过一遍，能明显改善230，回收率一般也够用。我们以前做肝脏RNA，过柱后230能到1.7以上，RIN和28S/18S比单纯看260/230更有参考价值。注意过柱会损失一些RNA，所以得率要重新测。Trizol提取本身对多糖脂肪的去除有限。
T
Tony
2026-07-25
260/230低更常见的是氯仿取上清时带到了有机相或盐残留。肝脏匀浆太剧烈、分层后离心时间短，都会让中间层蛋白和下层有机相混上来。建议你取上清时不要贪多，留约1mm，再补等体积氯仿抽提一次，然后异丙醇沉淀；75%乙醇洗两次，第二次离心时间延长。匀浆时冰浴间歇，也可以减少有机相乳化。这种做法我做过，比值能改善不少，尤其脂肪肝样本。
飞
飞飞达人4426
2026-09-23
动物营养试验取肝脏，建议安乐死后尽快取小块，冰上剪碎再入Trizol。30mg用1mL Trizol理论上够，但电动匀浆时间要短、间歇冰浴，避免过热导致乳化。脂肪多的肝脏可先用预冷PBS轻轻冲一下血水，吸水纸吸干再入Trizol。260/230 1.2如果RNA得量和完整度都够，可以继续实验，但在报告里注明纯度偏低，避免审稿人追问。
P
Plateing9528
2026-09-24
肝脏本身脂肪和糖原确实可能影响260/230，但1.2不一定全是脂肪。你260/280有1.85、28S和18S条带也还行，说明RNA主体问题不大。糖原在异丙醇沉淀时容易一起带下来，会让沉淀变胶状、230偏高。可以试试把取样量降到20mg以内，或者Trizol加到1.5mL；异丙醇沉淀后如果沉淀偏透明，用75%乙醇多洗一次，尽量吸干。下游如果不是特别敏感的实验，可以先跑胶看完整度，别只盯230。
Write an AnswerSign in to answer
Sign in required to answer (browsing is open). Sign in