Question Detail
Can the CCK-8 kit still be used after repeated freeze-thaw cycles? Should it be aliquoted or stored as a whole bottle at 4°C?
Medical Devices
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How to Answer This Question
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Read the Context
Read the full description, category and tags to understand the real scenario.
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Give an Actionable Answer
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Reference standards, papers or product manuals to make the answer more credible.
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All Answers4
O
OscarExtract
2026-09-10
除了冻融，还要排查光照、污染和操作。CCK-8对强光敏感，分装后要避光；枪头和分装管要干净，避免带入还原性物质，否则背景高。你这个现象不一定只是冻融引起，培养基pH、酚红、孵育温度变化也会影响OD。不同品牌配方有差异，有的4°C可放几周，有的要求-20°C，拿到新批次一定按说明书保存。使用时不要反复从母液里直接取用，分装是最稳妥的办法。
C
CindyBuffer7326
2026-09-13
你现在这个情况很像反复冻融造成的影响。CCK-8一般不建议整瓶反复化冻，虽然WST-8本身相对稳定，但反复冻融容易让缓冲成分或电子载体局部析出，造成背景高、信号偏低。建议先查看说明书，大部分品牌长期保存在-20°C避光，4°C只适合短期。如果还没买新的，最好按一次实验量分装，比如每管1-2 mL或够一块板的量，-20°C冻存，用前取一管化冻后室温平衡，不要整瓶反复冻。
李
李学生
2026-09-22
正确保存是分装，而不是整瓶放4°C。4°C避光保存通常只是短期，时间一长背景也会慢慢升高。分装时用干净、低吸附的螺口管或离心管，避免污染，分装前轻轻颠倒混匀，不要剧烈震荡。每次分装量要根据你常用孔数算好，避免化冻后反复冻融；一管最好一两次内用完。分装后外面包铝箔或放避光盒，-20°C冻存。用前提前取出，等恢复室温再开盖，防止水汽凝集滴进试剂造成污染。
田
田文298
2026-09-17
已经反复冻融并且OD偏低、背景高，我不建议再用于正式实验。可以把它留着做预实验、染色条件摸索，或者和新批次做平行对比；如果空白孔明显升高、细胞孔与背景值拉不开，就说明可靠性有问题。不要为了省试剂让原代细胞样本白做。买新试剂到货后，先分装，再做一次空白和阳性细胞孔，记录基线。后续如果出现异常，可以判断是试剂批次问题还是操作问题。
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