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T
TonyAssay3117
2026-09-20
裂解液成分很关键。避免用含SDS、NP-40、脱氧胆酸钠等强去垢剂的RIPA，这些会破坏抗原抗体结合，造成本底高或假阳性。改用PBS或含0.1% Triton X-100的低渗缓冲液，加蛋白酶抑制剂cocktail和PMSF，冰上裂解后4°C离心取上清。抑制剂一般不影响ELISA，但要注意PMSF半衰期短，使用前现加。
W
WendyAssay
2026-09-13
脑组织本底高多为基质效应。先不要直接测原液，用试剂盒样本稀释液做1:2、1:5、1:10三个稀释度回算，若回算浓度随稀释倍数上升，说明存在基质抑制或假信号；若回算浓度下降，可能本底干扰。海马样本蛋白量高，建议至少1:5起试。样本量少可先取3ul做稀释预试，不必一次用十几微升。
T
Tube6470
2026-09-21
低样本量可以找高敏或低样本量版本试剂盒，这类通常允许1:1或1:2稀释，减少样本用量。十几微升够做1个复孔，但建议至少留出上下样重复，所以优先选标曲灵敏度1-2 pg/mL的盒子。品牌方面可关注欣博盛、联科、Thermo高敏系列等，但要确认是否验证过脑组织匀浆，不要只看血清数据。
董
董阳
2026-09-20
本底排查时设置样本空白：负责孔只加样本和稀释液，不加检测抗体/酶标抗体，如果显色仍然高，说明是内源性过氧化物酶或样本成分与底物反应；可换用含HRP抑制剂的稀释液或购买专门适用于组织匀浆的试剂盒。洗板建议用洗板机或手动每孔300ul洗5次。货期上国产现货一般2-5天，进口高敏可能1-2周，下单前问清。
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