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大鼠IL-6 ELISA能同时测血清和组织匀浆吗?

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提问:Plate7492 2026-05-31 浏览 230 4 个回答
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徐
徐质控 2026-09-25
60个样品不算少,先拿3-5个代表性血清和肝匀浆做预实验:分别原液、2/5/10/20倍稀释,确定最佳稀释倍数,再做加标回收。正式实验中血清和组织样本尽量分板测,但每块板都带标准曲线和两个质控。组织匀浆样本复孔CV容易高,建议匀浆后分装冻存,避免反复冻融。加样前样本恢复到室温并低速离心去沉淀。板间差可以用同批样本在不同板间重复一个质控来监控。
E
Extract8774 2026-09-16
单孔成本15以内,96T国产盒基本能做到。大鼠IL-6可重点问联科、达优、四正柏、欣博盛这几家,让技术支持提供组织匀浆样本的应用数据或参考文献。采购前确认说明书样本类型是否包含“组织匀浆/组织裂解液”,标准曲线范围是否覆盖你预期。如果某品牌只有血清/血浆验证,不建议直接测组织,除非自己做完整平行性和加标。预算紧张也别选不知名贴牌,出问题排查成本更高。
O
OscarCell8490 2026-09-27
同一盒测血清和肝组织匀浆是可以的,但组织匀浆别用含强去垢剂的裂解液。SDS、Triton X-100浓度高会干扰抗原-抗体结合,使标曲和匀浆基质不平行。建议用PBS+蛋白酶抑制剂或试剂盒说明里推荐的温和裂解液,冰上匀浆后4°C、10000×g离心10分钟取上清。可过0.22μm滤膜去脂。肝组织匀浆IL-6水平与炎症程度相关,先测BCA总蛋白,最后数据归一为pg/mg蛋白,比单用pg/mL更可比。
曹
曹阳8699 2026-09-24
去垢剂影响主要看浓度。如果已经用了含去垢剂的裂解液,优先稀释5-20倍把去垢剂浓度降下来,同时用试剂盒的稀释液稀释。判断影响的方法是做平行性:把匀浆上清做2、5、10、20倍系列稀释,看稀释后实测浓度是否稳定。如果随稀释倍数升高浓度计算值明显漂,说明基质干扰存在。血清一般原液或2倍,组织匀浆建议至少5倍起步。急性炎症模型肝组织IL-6可能高,别直接原液测。
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