Applications拯救你的基质胶！常见问题速效救心丸

基质胶实验遇到问题手忙脚乱，不知道如何快速解决。别慌！翌圣生物整理基质胶常见问题及解决方案，快速定位、快速修复，让实验立刻重回正轨。

基本性能问题

1.收到货后如何保存？

将本产品置于-20℃环境存放；若短期使用，4℃存放建议不超过7天，且避免反复取用。

2.能否反复冻融？

不建议反复冻融；首次融化后立即分装（200 µL/管），-20 ℃保存。切勿将基质胶储存于自动除霜的冰箱中。

3.如何进行融化？

冷冻状态的基质胶可以在操作前一天置于碎冰中，再转移入4 ℃冰箱，次日即可使用。适当延长4℃融化时间可以有效减少基质胶中的气泡。请勿将基质胶瓶直接放在 4℃冰箱中融化，也请勿将冰盒及基质胶放置在冰箱门上或冰箱靠门的位置。

4.基质胶融化时发现有凝胶，融化不了是怎么回事？

基质胶对温度非常敏感，超过10℃即开始成胶，超过22℃成胶速度会更快。如果到货情况正常，出现此种现象应该是融化操作不规范或者融化期间环境温度升高导致部分凝胶。请一定严格按照融化操作规范执行，确保融化时保持低温环境。

5.使用基质胶时需要注意哪些方面？

所有接触基质胶的试剂耗材产品都需要预冷，操作过程应全程在冰上操作，确保低温环境。基质胶对温度高度敏感，在10℃以上开始缓慢凝胶化，22℃以上成胶速度显著加快。

场景高频问题

1. 皮下成瘤

A.荷瘤不成功的解决方案

（1）取处于对数生长期的细胞，细胞达80-90%左右密度为宜。

（2）选择4-6周龄裸鼠，小于4周可能不耐受过早死亡，大于6周免疫力会增强，不易成瘤。

（3）可能是小鼠免疫排斥，建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠。

B.肿瘤长起来后又消失的原因

可能由免疫排斥、细胞活力不足或基质胶吸收后细胞失巢凋亡所致；建议更换免疫缺陷程度更高的小鼠品系（如NSG小鼠）。

2. 血管生成实验中细胞不能形成连续的网格

（1）建议使用3-5代状态较好且融合度70%-80%的HUVEC细胞。

（2）细胞数量过少会使细胞无法形成连续的网络。

（3）4-18 h可见血管生成。建议每4个小时观察一次。

3. 侵袭实验细胞不转移

（1）细胞侵袭转移能力比较弱。

（2）细胞的活性太差，活性不好的细胞做侵袭实验难度较大。

（3）用胰酶消化后，必须充分洗涤去除血清残留，避免上室中血清干扰趋化梯度。

4. 类器官实验

A.类器官传代的标准

不同类器官时间不同，传代时机应根据类器官类型和生长状态判断，通常于培养7–14天、类器官直径达100–300 μm（依类型而异）时进行。

B.鉴定类器官的方法

最基础的通过显微镜和H&E染色观察类器官形态；进一步可以用免疫荧光检测该类器官是否表达相应的biomarker。

C.为什么观察到的形态和文献不一致？

决定类器官形态的因素有很多，样本来源是否相同、选用的细胞因子品质是否有差异都有可能改变最终的类器官形态。

选择翌圣 Ceturegel® 基质胶，从源头减少问题

根据客户实验推荐实验步骤及配套试剂

1、皮下成瘤

https://mp.weixin.qq.com/s/u1Jt01h3ZPwbOwaDNWQd9Q

2、血管生成

https://mp.weixin.qq.com/s/ZOeS5xXaFjiuzblIqYF33w

3、细胞侵袭

https://mp.weixin.qq.com/s/iXYgdhbKSt7oq1qkDZVPjg

4、类器官培养

根据不同组织具体步骤参照说明书

https://www.yeasen.com/solutiondetail/1012

产品信息