Case Studies细胞转染 | U251胶质母细胞瘤细胞DNA转染案例
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
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实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)细胞计数:从培养箱取出细胞,细胞悬液吹打混匀,使用细胞计数仪检测细胞活率及密度。细胞传代(直接稀释法):根据计数结果,将细胞按照5E5 cell/mL左右进行细胞传代。
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
卵巢癌类器官(Ovarian Cancer Organoids,OCOs)是源于卵巢癌组织或肿瘤细胞的三维体外培养模型,通过模拟体内肿瘤微环境(细胞外基质、特异性细胞因子及小分子化合物),让肿瘤细胞在体外自我组装形成具有三维结构、保留原发肿瘤核心生物学特征的“微型肿瘤”。其本质是对体内卵巢癌的“体外复刻”,是连接基础研究与临床转化的核心工具。01卵巢癌类器官
肠道是人体重要的消化器官,肠指的是从胃幽门至肛门的消化管,是消化器官中最长管道,人体肠道结构主要包括小肠和大肠。肠道疾病非常常见,如肠梗阻、慢性炎症性肠病、结直肠癌等,其中结直肠癌已成为威胁人类健康最严重的疾病之一。因此,肠道的研究是现在非常热门的领域,有着广阔的应用前景。01人肠类器官培养步骤人肠类器官的培养重悬隐窝基质胶混合物,孔板中加入一定量的混合物和
宫颈癌类器官是指利用宫颈肿瘤细胞等在体外培养出的3D细胞培养物并具有一定的空间结构组织类似物。宫颈癌类器官可以作为疾病模型,相较于传统2D疾病模型,其在阐明疾病的发展、稳态性和发病机理等与体内环境更加接近,能作为宫颈癌治疗、诊断和发病机制研究的理想试验模型。01宫颈癌类器官培养步骤样本预处理(手术切除样本/宫颈活检样本)新鲜样本处理(黄金时间:离体后1h内)
结肠癌类器官是利用患者自身的结肠癌组织样本,在特定三维培养条件下培育出的微型肿瘤模型。它能高度模拟原始肿瘤的复杂结构、基因特征和药物反应,为科学家研究癌症机制、为医生筛选有效抗癌药物提供了强大的个性化工具。01结肠癌类器官培养步骤结肠癌类器官的分离为去除细胞沉淀中的红细胞,在冰盒中加入2 mL红细胞裂解液(40401ES)裂解5分钟,然后以600 g离心,P
乳腺癌类器官(Breast Cancer Organoids,BCOs)是源于乳腺癌组织或肿瘤细胞的三维体外培养模型,通过模拟体内乳腺肿瘤微环境(细胞外基质、特异性细胞因子及信号分子),让肿瘤细胞在体外自我组装形成具有三维结构、保留原发肿瘤核心生物学特征的“微型肿瘤”,是连接基础研究与临床转化的核心工具,尤其适配乳腺癌的高度异质性特征。01乳腺癌类器官培养步
小鼠气管类器官是从小鼠气管基底干细胞在体外3D基质胶中培养而成的微型器官。它能够自我更新和分化,形成包含基底细胞、纤毛细胞、分泌细胞(如杯状细胞)等多种气管上皮细胞类型的空腔结构,非常适合用于研究呼吸系统发育、疾病建模(如哮喘、慢性阻塞性肺疾病、感染)、药物筛选和再生医学。01小鼠气管类器官培养步骤气管组织分离与单细胞悬液制备消化后的细胞悬液通过70 μm滤
小鼠肾类器官的培养是一个基于发育生物学原理的精细过程,其核心是在体外模拟胚胎肾脏的发育环境,引导肾脏祖细胞自组织形成类似肾单位的结构。01小鼠肾类器官培养步骤第一步:后部中胚层诱导——奠定肾源性分化基础目标:将多能干细胞定向诱导为具有形成肾脏潜能的后部中胚层细胞。01细胞准备使用小鼠ESC或iPSC。将细胞以一定密度接种于基质胶(Ceturegel)(401
小鼠胃类器官的培养核心是“模拟体内胃组织发育微环境+利用胃上皮干细胞的自我更新与定向分化潜能”,通过体外重构关键信号通路、细胞外基质和营养条件,让胃源性干细胞(或组织片段)自发组装形成具有胃组织特异性结构和功能的三维器官样结构,本质是对体内胃上皮再生与稳态维持机制的体外复刻。01小鼠胃类器官培养步骤实验前准备培养基配制:基础培养基选用DMEM/F12(414