技术讲解细胞增殖/毒性检测方法大全(上)——化学发光法检测
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础,是生物体的重要生命特征。细胞通常以分裂的方式进行增殖。细胞毒性(cytotoxic)是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础,是生物体的重要生命特征。细胞通常以分裂的方式进行增殖。细胞毒性(cytotoxic)是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。
荧光检测一般采用细胞外标记染料(如CFSE、BrdU和EdU)或内源性蛋白(如Ki-67)作为指示物,通过荧光显微镜或流式细胞术进行检测。而流式检测则是将染有不同细胞表面标记的细胞样本经过荧光激发后在流式细胞仪中分析,通过对荧光信号的定量测量来确定不同分子标志物在不同时间点和条件下的表达和变化。两种检测方法都可以用于细胞增殖、表观遗传学和细胞周期等方面的研究
巨噬细胞的发现可追溯到1882年,生物学家 Ellie Metchnikoff 在研究缺乏适应性免疫机制的原始动物时发现,并将这些细胞称为吞噬细胞。巨噬细胞是具有异质性的一群免疫细胞,具有高度可塑性,具有多种功能,包括组织发育和体内平衡、清除细胞碎片、消除病原体和调节炎症反应。不同的诱导信号可激活巨噬细胞改变其自身的形态和生理特征。
CCK-8法目前是生命科学研究中检测细胞增殖和毒性应用最广泛的方法之一,截至2022年,在Pubmed数据库中利用CCK-8试剂发表的文献数逐年递增。
标签抗体的组成一般分为蛋白标签和目的蛋白两部分。标签抗体(Tag Antibody)可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列,分析目的蛋白的表达含量及其功能。其原理是抗原—抗体反应,这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。
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ADC药物也叫抗体偶联药物(antibody-drug conjugate,ADC),是由靶向肿瘤特异性抗原抗原的单克隆抗体(Antibody)与小分子毒素通过连接子偶联组成。其兼具单抗药物的高靶向性以及细胞毒素在肿瘤组织中高活性的双重优点,可高效杀伤肿瘤细胞,较化疗药物副作用更低。
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