Case Studies血管生成实验案例二:瑞金医院(高糖损伤建模)
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板材料准备:准备好实验所需材料,包括Ceturegel®基质胶、24孔板、HUVEC细胞、以及预冷的枪头和EP管。全程低温操作:实验开始前,将Ceturegel®基质胶放置于装有碎冰的冰盒中,于4℃冰箱过夜解冻。将
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板材料准备:准备好实验所需材料,包括Ceturegel®基质胶、24孔板、HUVEC细胞、以及预冷的枪头和EP管。全程低温操作:实验开始前,将Ceturegel®基质胶放置于装有碎冰的冰盒中,于4℃冰箱过夜解冻。将
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻:实验前,将Ceturegel®基质胶放置于装有碎冰的冰盒中,于4℃冰箱过夜解冻。全程低温操作与铺板:所有步骤在冰上进行。使用预冷的枪头,取 200µL 融化的基质胶原液,加入预冷的24孔板孔底中央。用
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻:实验前,将Ceturegel®基质胶放置于装有碎冰的冰盒中,于4℃冰箱过夜解冻。全程低温操作:实验开始前约1小时,将24孔板和枪头预冷。所有涉及基质胶的步骤在冰上进行。铺板与聚合:使用预冷的枪头,向2
实验所用试剂设备清单货号产品名称18701ESMolPure® Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA fast Kit 通用全血/细胞/组织/细菌DNA快速提取试剂盒10406ESRNase A 核糖核酸酶A(100 mg/mL)—无水乙醇实验前准备1.需要自备乙醇,异丙醇,1×PBS,RNaseA。2.开始实验前将需要的水浴先预热到
实验所用试剂设备清单货号产品名称18701ESMolPure® Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA fast Kit 通用全血/细胞/组织/细菌DNA快速提取试剂盒10406ESRNase A 核糖核酸酶A(100 mg/mL)—无水乙醇实验前准备1.需要自备乙醇,异丙醇,1× PBS,RNaseA。2.开始实验前将需要的水浴先预热
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
插入片段信息片段长度441 bp片段浓度20 ng/μL片段纯化方式琼脂糖凝胶电泳切胶纯化回收载体信息载体长度3000 bp载体浓度50 ng/μL载体纯化方式琼脂糖凝胶电泳切胶纯化回收反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix10 μL片段1 μL载体1.2 μL无菌超纯水7.8 μL50℃反应
插入片段信息片段长度1104 bp片段浓度51 ng/μL片段纯化方式琼脂糖凝胶电泳切胶纯化回收载体信息载体长度3000 bp载体浓度50 ng/μL载体纯化方式琼脂糖凝胶电泳切胶纯化回收反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix10 μL片段1.3 μL载体1.2 μL无菌超纯水7.5 μL50
插入片段信息片段长度1800 bp片段浓度50 ng/μL片段纯化方式琼脂糖凝胶电泳回收载体信息载体长度7200 bp载体浓度20 ng/μL载体纯化方式琼脂糖凝胶电泳回收反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix5 μL片段1 μL载体4 μL无菌超纯水0 μL50℃反应5分钟。克隆生长情况阳性
插入片段信息片段长度1011 bp片段浓度65 ng/μL片段纯化方式片段扩增胶回收载体信息载体长度10000 bp载体浓度13 ng/μL载体纯化方式载体酶切纯化反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix5 μL片段1 μL载体4 μL无菌超纯水0 μL50℃反应5分钟。克隆生长情况阳性克隆鉴定
插入片段信息片段长度1000 bp片段浓度270 ng/μL片段纯化方式试剂盒纯化载体信息载体长度10000 bp载体浓度35 ng/μL载体纯化方式试剂盒纯化反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix5 μL片段0.5 μL载体4.5 μL无菌超纯水0 μL50℃反应30分钟。克隆生长情况左为翌
插入片段信息片段长度1186 bp片段浓度18.6 ng/μL片段纯化方式试剂盒纯化载体信息载体长度10000 bp载体浓度86.1 ng/μL载体纯化方式试剂盒纯化反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix5 μL片段2 μL载体2 μL无菌超纯水1 μL50℃反应30分钟。克隆生长情况阳性克隆
插入片段信息片段长度785 bp片段浓度20 ng/μL片段纯化方式切胶回收载体信息载体长度11321 bp载体浓度30 ng/μL载体纯化方式切胶回收反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix5 μL片段1 μL载体3 μL无菌超纯水1 μL50℃反应30分钟。克隆生长情况阳性克隆鉴定结果客户评
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3