应用方向翌圣生物低dsRNA T7 RNA聚合酶为mRNA应用的安全性增加一重保障!
在这一过程中,T7 RNA聚合酶(T7 RNAP)扮演着至关重要的角色,它能够高效地催化体外合成mRNA的过程。
随着生物技术的飞速发展,mRNA疗法作为一种新兴的治疗手段,因其可编程性强、响应速度快等优势备受关注。在mRNA疫苗和基因治疗等领域中,高效合成高质量的mRNA是实现疗法目标的关键步骤。而在这一过程中,T7 RNA聚合酶(T7 RNAP)扮演着至关重要的角色,它能够高效地催化体外合成mRNA的过程。
尽管T7 RNAP在mRNA合成中发挥着重要作用,但实际操作中经常会产生double-stranded RNA(dsRNA)副产物。dsRNA是许多病毒的标志之一,因此它容易被细胞内的dsRNA结合蛋白识别,并触发先天免疫反应和炎症反应。这意味着,如果mRNA制剂中含有较高的dsRNA,可能会导致不必要的免疫激活,进而影响治疗效果或引起副作用。过多的dsRNA也可能会干扰mRNA的正常功能,包括翻译效率和mRNA的稳定性,间接影响mRNA治疗的效果。

图1.dsRNA副产物的影响与优化后的T7 RNAP反应[1]
因此,开发和采用有效的方法来减少dsRNA的生成是mRNA技术发展中至关重要的一部分。研究者们已经开发了多种策略,包括使用改良的T7 RNA 聚合酶,化学修饰核苷、调整 IVT 转录buffer,下游纯化工艺等方法。翌圣生物利用其ZymeEditor定向进化平台的能力,持续在进化mRNA体外合成的核心酶原料—T7 RNA聚合酶,开发出一款低dsRNA T7 RNA 聚合酶,抑制T7 RNA 聚合酶的RDRP活性,从根本上降低dsRNA的形成,从而可以大幅度降低dsRNA的含量。
产量:稳定在9mg/mL以上;
dsRNA含量:dsRNA的含量显著降低了至少10倍以上;
片段加帽率高:均超过99%。

在不同长度的应用场景下,dsRNA无论跟WT T7 ,还是竞品,在保证其他指标不降的前提下,dsRNA 均有极显著下降。
片段长度 | T7 RNA pol | 产量(mg/mL) | 完整度(%) | dsRNA含量((1ug RNA产生 ng的dsRNA) |
4K | T7-WT | 12.4 | 88.3 | 0.4273 |
T7-低dsRNA | 12.1 | 89.9 | 0.0129 | |
竞品A | 11.0 | 87.8 | 0.0323 | |
9K | T7-WT | 9.5 | 81.9 | 2.9180 |
T7-低dsRNA | 9.0 | 82.0 | 0.0379 | |
竞品A | 7.2 | 78.7 | 0.1805 |

降低Cap analog的投入量,在不同的片段长度,以及与WT的对比下,投入量降低到2.5mM, 仍能得到优异的加帽率。同时在细胞层面上,也能得到优异的表现。
Cap analog投入量(mM) | 加帽率(%)-4K | 1K | |
WT | mutant | WT | |
10 | 100 | 100 | 100 |
5 | 100 | 100 | 100 |
2.5 | 100 | 100 | 99.7 |

翌圣公开的文章《FADS and semi-rational design modified T7 RNA polymerase reduced dsRNA production, with lower terminal transferase and RDRP activities》阐述了一项创新性研究。基于这项研究成果,翌圣已向中国、美国提交了专利申请。
产品名称 | 货号 | 规格 | 体积 |
Cleascrip™ T7 RNA Polymerase GMP-grade (low dsRNA, 250 U/μL) | 10629ES10 | 10KU | 40 μL |
10629ES60 | 100 KU | 400 μL | |
10629ES86 | 2500 KU | 10 mL | |
10629ES96 | 25MU | 100 mL | |
10629ES99 | 100MU | 400 mL |
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站内暂未收录 · 可询价 图 T7 RNA Polymerase (50 U/μL)
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站内暂未收录 · 可询价 图 10× Transcription Buffer GMP-grade (Mg2+...
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站内暂未收录 · 可询价 图 T7 RNA Polymerase (250 U/μL)
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站内暂未收录 · 可询价 图 T7 High Yield RNA Synthesis Kit (low dsR...
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