ApplicationsExonuclease I：特异性去除单链DNA，PCR引物去除的最佳选择

注：如果您是想查询核酸外切酶Ⅲ（Exonuclease III)，可点击链接获取产品应用详情或通过下方链接直接订购（核酸外切酶I（Exonuclease I））。

核酸外切酶I（Exonuclease I）是一种对变性或单链脱氧核糖核酸具有高度选择性的核酸外切酶，作用时，Exonuclease I从单链聚脱氧核糖核苷酸的3 羟基端开始攻击，随后逐步释放出脱氧核糖核苷5 ' -单磷酸盐，但末端二核苷酸会保持完整，对双链DNA或RNA无活性。

图1. Exonuclease I降解单链DNA示意图

1.常用于在Sanger测序或SNP分析之前去除PCR反应中的单链引物（了解详情）；

2.去除巢式PCR中的单链引物；

3.PCR产物酶法纯化（了解详情）；

4.从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA等

翌圣的Exonuclease I（Cat#14535ES）由分子酶改造平台——ZymeEditor™重组表达而来，可高效消化单链DNA，严格质控，无核酸外切酶（双链）、核酸内切酶、RNase残留，酶性能稳定，效期长达2年，只需80℃处理15 min即可使酶失活，简化了您的实验流程，适用于各种PCR反应后引物的去除及从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA。

20 μL反应体系中加入终浓度为15 pmol/μL的单链DNA底物，分别使用不同投入量（0.63、1.25、2.5、5、10、20 U）的翌圣及品牌N*的Exonuclease I在37℃下孵育15 min，80℃热失活15 min，聚丙烯酰胺凝胶电泳检测单链DNA降解情况。结果显示翌圣的Exonuclease I消化单链DNA的能力与品牌N*一致。

图2. 翌圣及品牌N*对单链DNA的消化能力

将500 ng底物DNA与100 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带不发生变化，表明Exonuclease I无核酸内切酶残留。

图3. 核酸内切酶残留检测

将底物RNA与20 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测RNA条带不发生变化，表明Exonuclease I无RNase残留。

图4. RNase残留检测