Q：
10615ES酶法加帽中先升温再降温的目的是什么？在放大生产时好像很难做到先升温再降温。
先升温是为了把RNA二级结构打开，让RNA处于单链状态。如果不进行这步操作的话，会影响加帽的效率。这部分目前的确是工艺生产上的难点。现在有的公司直接在模板序列确定时会对RNA的二级结构作预测，加帽酶只识别mRNA前几个核苷酸，如果确定这部分结构不会产生RNA的二级结构的话，可以不进行加热。
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