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扩增产量偏低,同等模板下产物浓度远低于预期?

Q:

扩增产量偏低,同等模板下产物浓度远低于预期?

  • 提升反应温度至42℃;
  • 延长孵育时间,RCA 标准 4 h 可延长至 6 h;MDA 4 h 延长至 12–16 h;
  • 体系添加无机焦磷酸酶,解除焦磷酸产物对聚合酶的反馈抑制;
  • 小幅上调镁离子、硫代随机引物终浓度,梯度摸索最优区间;
  • 排查模板完整性,降解严重微量样本可适度提高模板投入量。
工具酶 👁 72

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