前沿资讯新品|翌圣GMP级别RNA合成酶原料:BsaI
严格质控,高效完成质粒线性化!
mRNA合成的关键步骤之一是将质粒DNA进行线性化,这一步需要使用限制性内切酶,IIs型内切酶是质粒线性化的首选内切酶,因为它们在识别位点下游切割DNA,可确保所设计的poly(A)尾的完整性,线性化后的DNA模板上不会留下“疤痕”,IVT过程中也不会添加不需要的核苷酸。BsaI是常见的IIs型内切酶之一,在mRNA合作中起着重要作用。

图1. BsaI识别位点及切割序列
翌圣的BsaI由大肠杆菌重组表达,GMP标准生产,酶切效率高、星号活性低、末端完整性良好,可用于mRNA疫苗生产的质粒线性化、慢病毒/腺病毒包装的载体构建、质粒制备的酶切验证、Golden Gate组装等。
产品特点
严格按照GMP标准生产,确保无动物源成分引入。核酸酶,蛋白酶、宿主DNA/蛋白残留、支原体、内毒素等均严格质控确保产品质量。
具有高酶切效率,37℃反应16 h无星号活性,经酶切—连接—再酶切测试末端完整性良好。
将20 U BsaI与底物DNA在37℃孵育 1 h和16 h,琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示翌圣BsaI无非特异性核酸酶残留。

图2. 非特异性核酸酶残留检测结果
通过“酶切—连接—再酶切”的功能实验验证BsaI酶切的末端完整性,结果显示翌圣的BsaI末端完整性良好,与进口品牌效果一致。

图3. BsaI末端完整性检测结果
在37℃下,将BsaI及底物DNA在酶切反应体系中共同孵育16h,未检测到星号活性引起的底物非特异性降解,表明翌圣BsaI 16 h孵育无星号活性。

图4. BsaI星号活性检测结果
产品名称 | 货号 | 规格 |
Bsa I GMP-grade(20 U/μL) | 10661ES03/10/60 | 1KU/10KU/100KU |
10668ES03/10/50 | 1 mL/10 mL/50 mL |
产品定位 | 产品名称 | 货号 |
质粒线性化 | 10664ES | |
Bsa I GMP-grade(20 U/μL) | 10661ES | |
模板去除 | 10611ES | |
体外转录 | 10625ES | |
10620ES | ||
10621ES | ||
10614ES | ||
10612ES |
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