应用案例小鼠RAW264.7细胞诱导为巨噬细胞实验方案
实验步骤一、M1极化1.接种:6孔细胞培养板(84011ES),每孔2×105个细胞(细胞不宜过多,否则影响极化效果),37°C,5% CO₂培养24h,让其充分贴壁。2.M1型诱导:将培养基更换为DMEM(41401ES)+2%FBS(40132ES)(减少血清中细胞因子的影响),并加入重组小鼠IFN-γ(91212ES,25 ng/mL)和LPS(607
实验步骤
一、M1极化
1.接种:6孔细胞培养板(84011ES),每孔2×105个细胞(细胞不宜过多,否则影响极化效果),37°C,5% CO₂培养24h,让其充分贴壁。
2.M1型诱导:将培养基更换为DMEM(41401ES)+2%FBS(40132ES)(减少血清中细胞因子的影响),并加入重组小鼠IFN-γ(91212ES,25 ng/mL)和LPS(60747ES,100 ng/mL),设置对照(仅细胞,不加诱导剂),37°C,5% CO₂培养24h。
二、M2极化
1.接种:6孔细胞培养板,每孔2×105个细胞(细胞不宜过多,否则影响极化效果),37°C,5% CO₂培养24h,让其充分贴壁。
2.M2型诱导:将培养基更换为DMEM+2%FBS(减少血清中细胞因子的影响),并加入重组小鼠IL-4(90144ES,20ng/mL),设置对照(仅细胞,不加诱导剂),37°C,5% CO₂培养24h。
翌圣最新推出92648ES-Mouse RAW264.7 Cell Polarization Induction Set 小鼠RAW264.7细胞诱导极化试剂盒,黄金配比、高性价比、更省心更便捷。
该套装共包含3种试剂:
重组小鼠IL-4:通过激活STAT6通路,驱动巨噬细胞向替代激活的M2表型转化
重组小鼠IFN-γ:“启动”信号,上调巨噬细胞对后续刺激的反应性
LPS:通过TLR4通路引发强烈的促炎反应,和IFN-γ将RAW264.7细胞极化诱导为M1型巨噬细胞
实验案例
图1. 流式分析数据(数据来源于重庆医科大学)
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