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应用方向让RNA建库,像RT-PCR实验一样操作简单

📂 NGS测序 类型 ID 5003
👁 12,535 次浏览 🗓 2026-10-12 源站内容 ID:3349

预混版RNA建库试剂盒给您不一样的操作体验

时代在发展,科学在进步。高通量测序技术已经走进越来越多的课题组,RNA-seq也不再高冷而神秘,已经作为常规的基础实验出现在各大期刊内。但是,是否仍然有人看到RNA-seq就头大、就畏惧,就觉得特别难呢?

预混版RNA建库试剂盒,解决了您的实验问题。试剂组分通过提前预混,精简组分,操作时,再也不用担心试剂漏加;样本多时,再也不用担心预配置试剂少了;实验上,再也不用担心加错组分了!

图:预混版与非预混版的试剂差异

让RNA建库,像RT-PCR实验一样简单,是怎么做到的呢?我们来看看操作步骤:

操作步骤

RNA建库

RT-PCR

RNA提取

有

有

gDNA去除

无

额外加三种试剂(ddH2O、gDNA digester buffer、gDNA digester),PCR一次

RNA片段化

额外加一种试剂(Frag/Prime Buffer),PCR一次

无

逆转录

额外加一种试剂(1st Reaction Module),PCR一次

额外加四种试剂(ddH2O、逆转录酶、逆转录buffer、逆转录引物),PCR一次

二链合成

额外加一种试剂(2nd Reaction Module),PCR一次

无

接头连接

额外加一种试剂(Ligation Reaction Module),PCR一次

无

PCR扩增

额外加两种试剂(扩增酶、接头引物),PCR一次

额外加四种试剂(ddH2O、扩增酶、扩增引物、定量后模板),PCR一次

纯化

磁珠纯化

切胶回收

测序

二代测序

一代测序

后续步骤

无

载体构建等

从上面步骤,可以看到,预混版试剂,实验操作不再复杂,加一次试剂,PCR一次,共加5次试剂(每次只加一个组分),PCR程序设置5次,即能获得文库。减少失误,减少失败率,RNA建库就是如此easy。

实验操作简单化,原理不太懂?没关系,实验原理,实验操作,B站关注翌圣生物,各种实验操作、技术原理,一应俱全(翌圣生物的个人空间_哔哩哔哩_bilibili)。

适用样本?不限制,物种全适用,不挑样本,RNA提取后,根据提取的质量好坏,技术类型,选择mRNA建库还是lncRNA建库方式,预混版RNA建库都能兼容。

不相信?来,上数据。

1.不同物种mRNA建库

图:不同物种mRNA建库,文库主峰都集中在500 bp左右

2.自动化建库和手动建库都兼容

图:Illumina平台自动化和手动建库结果对比,文库一致,产量相当

图:MGI平台自动化和手动建库结果对比,文库一致,产量相当

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来源: 翌圣生物
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