前沿资讯翌圣荧光法RT-LAMP性能如何?测过都知道
等温核酸扩增技术(INAAT)主要用于分子生物学领域,用于鉴定和分析核酸。它主要用于DNA,RNA,细胞蛋白,离子,分子等。INAAT提供快速,灵敏和准确的遗传和感染性疾病诊断。
等温核酸扩增技术(INAAT)主要用于分子生物学领域,用于鉴定和分析核酸。它主要用于DNA,RNA,细胞蛋白,离子,分子等。INAAT提供快速,灵敏和准确的遗传和感染性疾病诊断。它提供扩增子,用于生产主要用于生物传感,生物成像和生物医学的各种核酸。此外,INAAT还用于检测多种疾病,如流感,艾滋病毒,结核病,衣原体和淋病(CT / NG),甲型肝炎和乙型肝炎等。等温扩增按照技术可以分为:LAMP、RPA、CPA、SDA、RCA、HDA等。
LAMP目前是等温扩增细分领域中应用较为广泛的技术,其采用4-6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物,依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性,在30分钟内扩增目的产物可达109-1010倍。LAMP检测方法分为多种,包括染料法、pH显色法、浊度法、HNB,钙黄绿素等。我司最新开发的荧光法检测试剂盒具有灵敏度高、引物适用性好、在特异性、耐受性和稳定性上均有较为优秀的表现。在与同类产品的对上,具有较为明显的优势。
表1.不同等温扩增技术对比
分类 | 引物数量 | 反应温度 | 酶数量 | 优点 | 缺点 | 临床检验 |
RPA | 4 | 30-42 | 3 | 反应时间短,较高的特异性 | 电泳检测时需要对产物进行纯化(扩增体系存在大量的酶类) | 病原体核酸检测;mRNA检测、突变基因检测 |
LAMP | 4 | 60-65 | 1 | 涉及的酶较少,灵敏度高 | 引物复杂 | 病原检测;基因突变检测和癌基因的分型 |
CPA | 5、6 | 63 | 1 | 涉及的酶较少,灵敏度和特异性高 | 引物及反应体系较为复杂、假阳性高 | 病原检测、癌基因检测、mRNA检测 |
SDA | 4 | 37 | 2 | 效率高、快速简便 | 需要非标准的核苷酸和昂贵的酶类,产物两端还残留核酸内切酶的识别序列 | 病原检测;基因突变检测、蛋白检查 |
RCA | 1或多 | 37 | 1 | 种类多、应用广泛、产物是单恋DNA | 需要环状DNA模板 | 蛋白检测;病原检测;细胞免疫 |
HDA | 2 | 37 | 2 | 引物设计简单;灵敏度高 | 只能扩增短序列;容易产生二聚体 | 病原体检测;miRNA的定量检测 |
RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)
产品特点

图1.LAMP试剂盒反应过程
操作简便:反应时间短,实验室环境要求低,可搭配微流控芯片或便携式检测仪快速检测;
灵敏度:50copies/T,25 μL体系;
引物适用性好:N-2 引物、E 基因引物、 内参引物扩增等均有较好的适用性;
特异性:48孔NTC完全不出峰,特异性较强;
耐受性:对部分核酸释放剂耐受性较好;
稳定性高:37℃稳定5天稳定性较好,可耐受反复冻融10次以上;
市场优势:性能优于同类国内外竞品,性价比高。
RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)
产品性能展示
灵敏度高

图2.灵敏度测试
图2:分别测试50 copies/T和25 copies/T两个拷贝数,测试结果表明在15min内,50 copies/T的结果表现更好,检出率达100%。
引物适用性

图3.N5锁核酸引物适应性检测

图4.N引物适应性检测

图5.ACTIN引物适应性检测
图3、图4:在N5锁核酸引物和N引物特异性检测中,按照50 copies/T进行,使用翌圣和N品牌进行对应的检测,结果显示,N5锁核酸引物适用性优于N品牌,N引物适用性两个产品基本一致。
图5:15ng的293DNA,采用翌圣和N品牌进行ACTIN引物适用性检测,结果显示翌圣适用性表现优异。
特异性

图6.48 孔NTC特异性检测
图6:对产品的特异性检测中采用48孔NTC检测,不起峰,表明特异性较优。
耐受性

图7.核酸释放剂耐受性检测
图7:采用100基质DEPC H20,核酸释放剂和DEPC H20各50%以及100%核酸释放剂分别进行检测,结果表明本产品对核酸释放剂的耐受性表现优异。
稳定性




图8.37℃热加速稳定性检测
图8:在37℃0天为对照,同温度下1、3、5天分别进行稳定性检测,表明其在37℃5天的情况下依然可以保持较为稳定的效果。

图9.-20℃反复冻融稳定性检测

图10.干冰反复冻融稳定性检测
图10:在-20℃和干冰反复冻融稳定性检测发现,-20℃反复冻融10次,干冰反复冻融5次,其稳定性表现均优异。
同类产品对比

图11.同类产品效果比对
图11:以引物N基因引物,在50 copies/T的情况下,采用翌圣、品牌N1、品牌N2进行产品对比验证,翌圣产品表现优异。
冻干球
翌圣生物该款试剂已研发出同等性能的冻干球产品,更多产品性能验证正在进一步测试中,敬请期待。

图12.冻干球
产品信息
产品名称 | 产品编号 |
13762ES | |
13906ES | |
13995ES |
其他相关产品信息
产品类别 | 产品名称 | 产品编号 |
Bst酶 | 14402ES | |
Bst Phus DNA Polymerase (2000 U/μL) | 14403ES | |
热敏UDG | 10303ES | |
10707ES | ||
逆转录酶 | 11111ES | |
HifairⅢ Reverse Transcriptase,600U/μl Glycerol-free第三代耐热逆转录酶(无甘油版) | 11297ES | |
MRI抑制剂 | 10603ES | |
10610ES | ||
10703ES | ||
dNTP | 10124ES | |
10128ES | ||
荧光染料 | 10223ES | |
10222ES |
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