选购指南产品推荐| SV40LTA&E1A残留DNA检测试剂盒

(1) 病毒载体生产质控： 对以HEK293T细胞包装的慢病毒、腺相关病毒（AAV）等病毒载体的中间品、半成品及成品进行SV40LTA和E1A残留DNA检测，确保符合CDE关于特定转化序列的残留控制要求。

(2) 细胞与基因治疗（CGT）产品放行： 对基于HEK293T细胞包装病毒载体所生产的CAR-T、TCR-T等细胞治疗产品，以及基因治疗制品的工艺中间品和终产品进行残留DNA控制，保障产品安全性与合规性。

(3) 细胞库检定： 对HEK293T工作细胞库及生产终末细胞进行SV40LTA和E1A序列残留检测，评估细胞基质的安全性。

(4) 工艺开发与验证： 用于评估和优化HEK293T细胞培养及下游纯化工艺对SV40LTA和E1A残留DNA的去除效率，辅助工艺开发与验证。

(1)标准品线性

标曲范围：SV40LTA 线性范围在 1.8×10¹~1.8×10⁵copies/μL，R²=1，扩增效率为 100.25%，各浓度检测值 CV<15%；

E1A 线性范围在 1.8×10¹~1.8×10⁵copies/μL，R²=1，扩增效率为 100.25%，各浓度检测值 CV<15%。

图2. E1A标曲线性图（左）和扩增曲线线性图谱（右）

（2）准确性

分别制备高中低浓度：1.8×10⁵copies/μL、1.8×10³copies/μL、1.8×10¹copies/μL 的 SV40LTA 和 E1A DNA 标准品样本，采用磁珠法残留 DNA 样本前处理试剂盒提取后检测（每个样本进行 2 个提取重复，每个提取做 3 个测试重复），分析样本回收率和 CV。对于不同浓度 DNA 样品回收率均在 70%~130%之间，CV 均<20%。

表2. 空白样本加标回收率

用5份不同背景溶液（高蛋白、高核酸、高盐、高低PH）对同一浓度样本（1.8×10²copies/μL的SV40LTA&E1A DNA）提取，每种背景溶液进行2个提取重复，每个提取做3个测试重复，分析样本回收率和CV。对于不同背景溶液的DNA样本回收率均在70%~130%之间，CV均<20%。

表3. 模拟样本加标回收率

（3）定量限

检测 1.8×10¹copies/μL（即 18copies/μL）、9copies/μL、4.5copies/μL、2.25copies/μL、1.8copies/μL 的 SV40LTA&E1A DNA，每个浓度 10 个重复。在 4.5copies/μL 及以上浓度，CV<20%，即 SV40LTA&E1A 残留 DNA 检测试剂盒的定量限为 4.5copies/μL。

图3. 4.5copies/μL SV40LTA DNA qPCR检测结果

图4. 4.5copies/μL E1A DNA qPCR检测结果

表4. SV40LTA和E1A定量限检测结