News上新 | 更高活性，更洁纯度：翌圣重组T4溶菌酶，破解蛋白/核酸提取效率瓶颈

在分子生物学、微生物学等生物学研究领域，从细菌样本中高效分离并获取高纯度的蛋白与核酸，是后续开展 Western Blot 蛋白印迹、PCR 基因扩增、基因测序等关键实验的核心基础。而细菌裂解作为提取流程的 “第一步关口”，却常因细胞壁破坏不彻底，导致细胞内的目标分子无法充分释放，最终造成回收率大幅降低，成为制约实验效率的核心瓶颈。

翌圣T4 Lysozyme是来源于T4噬菌体的一种重组胞壁质水解酶，由含有工程化的Enterobacteria phage T4 的基因E的E. coli菌株重组表达而来，通过水解原核细胞（革兰氏阴性菌和一些革兰氏阳性菌）肽聚糖中 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰葡糖胺之间的 β-1,4 键来破坏细菌细胞壁。

注：T4溶菌酶或鸡蛋清溶菌酶裂解表达ULP1的大肠杆菌：将1 g菌液沉淀重悬于30mL 50 mM Tris-HCl,0.5 mM EDTA, pH 7.5 Buffer中，加入Yeasen T4 溶菌酶（每 1 mL菌液中加入0.1、0.5、1、2 μg酶）或鸡蛋清溶菌酶（每 1 mL菌液中加入10、100、200、300 μg酶），室温温和颠倒（或静置）裂解5 min。通过低温（4℃）高速（12000g）离心30 min收集可溶性蛋白，并通过SDS-PAGE分析。

图4. 翌圣T4溶菌酶与Supplier A T4溶菌酶效果对比

注：翌圣T4溶菌酶与Supplier A T4溶菌酶裂解表达ULP1的大肠杆菌菌液：将1 g菌液沉淀重悬于30mL 50 mM Tris-HCl,0.5 mM EDTA, pH 7.5 Buffer中，加入Yeasen T4 溶菌酶或Supplier A T4溶菌酶（每 1 mL菌液中加入0.1、0.5、1、2 μg酶），室温温和颠倒（或静置）裂解5 min。通过低温（4℃）高速（12000g）离心30 min收集可溶性蛋白，并通过SDS-PAGE分析。

图5. 翌圣T4溶菌酶切口酶、RNase残留检测结果

注：将翌圣T4溶菌酶分别与核酸底物孵育，并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明，翌圣的3个批次T4溶菌酶均未检测出切口酶（1 μg）或RNase（1 μg）残留。

从实验痛点出发，以技术创新破局。翌圣重组T4 溶菌酶（Cat#14814ES），用更高活性、更优纯度、更洁净品质，重新定义细菌裂解标准。除此之外，翌圣生物还可提供核酸提取全套原料酶及核酸提取试剂盒产品，助力科研人员一站式解决核酸提取环节的各类需求，让实验流程更顺畅、结果更可靠。

参考文献：
[1]Baase W A, Liu L, Tronrud D E, et al. Lessons from the lysozyme of phage T4 [J]. Protein Science, 2010, 19(4): 631-641.
[2]Abouhmad A, Dishisha T, Amin M A, et al. Immobilization to positively charged cellulose nanocrystals enhances the antibacterial activity and stability of hen egg white and T4 lysozyme[J]. Biomacromolecules, 2017, 18(5): 1600-1608.