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News新品|多重免疫荧光——低丰度靶标检测新技术：酪酰胺信号放大(TSA)试剂盒

📂 蛋白质研究 Type ID 5005

👁 15,758 views 🗓 2026-10-13 Source ID：3251

酪酰胺信号放大（Tyramide Signal Amplification, TSA）是一类利用辣根过氧化物酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法，可在同一组织切片上进行多种抗原标记，是一种多标记的免疫荧光染色技术，广泛应用于ELISA、ISH、IHC等实验中。

Source: Yeasen Biotech ｜ Original: https://www.yeasen.com/solutiondetail/3251 ↗

多重免疫荧光染色（mIHC）技术，结合了免疫荧光（IF），免疫组化（IHC）和原位杂交（ISH）的技术特点，以酪胺信号放大技术（TSA）为基础，使得一张切片呈现多个靶标的集成化染色。相比于传统的IHC来说，多重免疫荧光的染色分辨率更高，荧光信号更强、更加稳定，并且不限制一抗种属大大降低了实验成本。

多重免疫荧光VS传统免疫荧光：

	基于TSA的多重免疫荧光	传统免疫荧光
靶点数目	不受限制（最多可同时染色7-10种）	一般标记3种（含DAPI），三种以上标记难度大
一抗种类	同一种属的不同抗体即可满足要求	不同种属的不同抗体
二抗种类	连接辣根过氧化物酶的同种属二抗	连接荧光探针的不同种属二抗
染色策略	任何样本无需任何染色策略，操作简单，样本以及靶点的差异性不影响染色过程	样本抗原的空间位置有差异，以及样本以及靶点的差异性会影响染色过程，导致过程复杂多变
染色效果	1. 染色分辨率及特异性高 2. 信号强度更强、更稳定 3. 沼灭时间更长，无背景影响 4. 各靶点的信噪比提高，适合组织基于单细胞的定量分析	1. 亮度较弱，容易淬灭； 2. 各种抗体检存在互相影响； 3. 对单细胞的定量分析不利；
实验成本	1. 可节省抗体用量； 2. 操作简单，无需预实验，减少实验损耗；	1. 抗体用量更多、种类更复杂，成本增加； 2. 需要寻找合适的染色策略；

TSA技术原理

TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H2O2下形成共价键结合位点)，产生大量的酶促产物，该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合，这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积，与随后加入的Streptavidin—HRP/荧光基团结合，经几次这样的循环放大，可以结合大量的酶分子或荧光基团，结果使其检测信号得到几何级放大。

TSA技术优势

应用范围广：可用于IHC、ICC、FISH等实验；
操作简单：工作流程与IHC、ICC、FISH等实验相似，仅需增加一个简单的孵育步骤对样本进行处理，就可以得到多色标记信号；
灵敏度高：比传统IHC、ICC、FISH等方法高100倍；
节约实验成本：可减少抗体或探针用量，提供更高的抗体稀释比例，降低了抗体的非特异性结合；
高分辨率及低背景：检测试剂更高程度的稀释能够降低非特异性标记；
兼容性高且多色共定位检测：与多种染料和检测系统兼容，可以进行多色标记以及共定位检测。

TSA技术路线

产品订购

产品名称	货号	规格
Fluorescein TSA Fluorescence System Kit 酪酰胺信号放大试剂盒	60405ES03	1 kit
Cy3 TSA Fluorescence System Kit 酪酰胺信号放大试剂盒	60406ES03	1 kit
Cy5 TSA Fluorescence System Kit 酪酰胺信号放大试剂盒	60407ES03	1 kit
TSA Multi-colour Immunofluorescence System Kit (4-Color) 酪酰胺信号放大多重标记试剂盒（四色法）	60410ES03	1 kit

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Original URL: https://www.yeasen.com/solutiondetail/3251

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