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Product data sheet PD-19021ES
MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit 无内毒素质粒小量提取试剂盒 MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit 无内毒素质粒小量提取试剂盒
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MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit 无内毒素质粒小量提取试剂盒

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柱式法提取细胞转染分子生物学实验
Product no.19021ES Sizes2 options SourceYeasen · Official
Cat. No. 19021ES50
现货 $257.00 促$515.00
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19021ES70 200 T $827.00促$1,655.00 现货 Enquire
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Overview

Specifications

Brand翌圣生物 Yeasen
Cat.No19021ES
Specification稳定性好:离心吸附柱内硅基质膜全部采用特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。快速、方便:30 min可从1.5-5 ml大肠杆菌LB(Luria-Bertani)培养液中,可快速提取多达20-50 µg纯净的高拷贝质粒DNA。纯
Origin翌圣生物科技(上海)股份有限公司
技术平台 柱式法提取
应用方法 细胞转染用于细胞转染实验 分子生物学实验用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等
适用物种种属 大肠杆菌
生物特性参数 试剂类型无内毒素质粒小量提取试剂盒 应用细胞转染、酶切、转化、PCR、体外转录、测序等 内毒素含量<0.1 EU/μg DNA
样本类型 菌液
技术参数 储存条件Part I组分-15~-25℃保存;Part II组分2~8℃保存;Part III组分室温保存。有效期2年。 提取方式柱式法提取
实验类型 质粒提取从大肠杆菌培养液中提取质粒DNA

FAQ

Q:加入去内毒素试剂后,溶液没有变得浑浊?

A:可能是本身内毒素低,也可能是加入 ER 溶液后,因为体系的 PH 差异、抑制物等,使得内毒素的凝集状态反应不一样。

Q:无内毒素质粒小提检测浓度很高?

A:客户的菌液量用了 20ml,太多了,导致 RNase 作用不足。

Q: 质粒浓度低

A: (1)拷贝数低或者大于10kb的质粒应加大菌体使用量,并按比例增加后续buffer的用量;(2)细菌可能没有充分裂解。

Q: 裂解液有沉淀

A: 裂解液中含有NaOH,可能盐离子析出,可 37℃温浴复溶至溶液澄清再使用。 ​

Q:质粒跑胶出现小于100bp小条带

A:可能RNA未去除干净(样本太多或者添加了RNase的缓冲液 RS酶活下降)或者裂解时间太长导致质粒受到破坏。

Q: 内毒素清除离心后分层不彻底

A: 提升离心温度;加大离心转速;增加离心时间。

Q: 提取的产量低

A: 中低拷贝质粒:长片段、表达型载体常以低拷贝为主,建议加大菌体使用量,菌液过夜培养;

菌种问题:菌种保存中质粒丢失,养菌前先划线活化,稳定产量;

菌体未充分裂解:在buffer种充分重悬,避免成团;

试剂准备有误:有沉淀析出的溶液需要加热;加入的乙醇体积不准;

洗脱不充分:洗脱液预热,二次洗脱。

Q: 有基因组污染

A: 培养时间太长:培养时间建议控制在12-16h;裂解不充分。

Q: 下游结果不理想

A: 盐离子污染;乙醇污染;质粒降解;层析柱膜脱落。

Documents & Citations

Published citations

[1] Han P, Cao P, Yue J, et al. Knockdown of hnRNPA1 Promotes NSCLC Metastasis and EMT by Regulating Alternative Splicing of LAS1L exon 9. Front Oncol. 2022;12:837248. Published 2022 Jun 23. doi:10.3389/fonc.2022.837248(IF:5.738)
[2] Zhang J, Wang W, Feng N, Jiang X, Zhu S, Chen YQ. Ndufa6 regulates adipogenic differentiation via Scd1. Adipocyte. 2021;10(1):646-657. doi:10.1080/21623945.2021.2007590(IF:4.534)
[3] Zhu S, Zhang J, Wang W, Jiang X, Chen YQ. Blockage of NDUFB9-SCD1 pathway inhibits adipogenesis : Blockage of NDUFB9-SCD1 pathway inhibits adipogenesis. J Physiol Biochem. 2022;78(2):377-388. doi:10.1007/s13105-022-00876-7(IF:4.158)

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