Gold Band Plus 3-color Regular Range Protein Marker (8-180 kDa) 三色预染蛋白质分子量标准（8-180 kDa）

Q：该产品可以直接使用吗？

A：当从-20℃拿出来后，应将本产品于室温融化后，轻柔混匀，使沉淀充分溶解。

Q：本品可作为天然蛋白分子电泳时的分子量参照标准吗？

A：不可以。因为本产品含 SDS，蛋白已变性。

Q：本品如何储存？

A：-20℃保存，经常使用可置于 4℃，建议分装保存，避免反复冻融！

Q：为什么该产品在跑胶的时候出现了不同程度的偏移情况？

A：预染蛋白Marker由于和染料结合，在不同电泳体系中位置是偏移的，都是仅供参考。 因为染料和蛋白结合后，一般都会比本来蛋白跑得更快一些的 ，我们和非预染Marker标定过的。比如有些厂家的180 kDa条带在Bis-Tris体系中的实际位置为140 kDa，而我们的180 kDa条带在Bis-Tris体系中的实际位置可达175 kDa，证明我们的偏移更小一些。参考图如下：

Q：Marker每条带的蛋白浓度是？

A：5微升Marker每条带平均蛋白含量约为2.5 ug

Q：此Marker可以显影吗？

A：理论来说Marker没有抗体结合位点，不会被显影，但是如果和目的蛋白有相似的结合位点会被抗体识别到，进而被显影。赛默飞也有对Marker显影的相关解释。这种可能性无法避免。

Q：预染蛋白Marker电泳后清晰，但是转膜后颜色变淡？

A：通常情况下，转膜后预染marker条带会更鲜亮，如果颜色变淡，可能有几种情况：

 1）转印不完全

 操作不当，比如，转膜没有加冰袋，温度过高；胶和滤纸没夹紧。

 转膜条件不适合，转膜时间过长可能透膜，转膜时间过短，蛋白可能残留在胶内。

 膜没有充分活化，甲醇浓度太高易造成蛋白穿膜，转移到滤纸上；未活化可能也可能导致膜吸附蛋白能力不强。

 膜孔径不适合，建议小分子蛋白使用0.22 um膜。

 2）转印正常，可能使用了特殊的转膜缓冲液，建议使用通用转膜缓冲液，或品质有保障的商用转膜缓冲液如翌圣快速转膜液。另外转膜液均不需要加SDS，若实验必须使用，建议SDS浓度不要超过0.02–0.04%。

Q：预染蛋白Marker电泳后清晰，但是洗膜后颜色变淡？

A：可能使用了比较特殊的缓冲液或者洗涤强度过强。建议使用通用缓冲液，或品质有保障的商用缓冲液，适当洗涤。较小孔径的膜可以在封闭和洗涤过程中更好地保留蛋白质。