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Southern杂交用试剂盒里变性液和中和液能不能通用其他品牌?

试剂选购
提问:Leo8764 2026-09-12 浏览 219 3 个回答
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S
Scienceer 2026-09-24
Southern变性液和中和液不同品牌大多数配方是通用基础配方:变性液一般就是0.5 M NaOH加1.5 M NaCl,中和液是1.5 M NaCl加0.5 M Tris-HCl,pH多在7.5左右。你只要用pH计确认新开瓶的pH在标示范围,没有沉淀、长菌,就可以和其他品牌混用。植物基因组20 μg/孔转尼龙膜,转膜效率主要看盐浓度和pH,通常偏差±0.2不会明显影响。建议先做一张小膜试转,用EB或凝胶成像确认,再批量做。
R
ResearchLab 2026-09-04
变性液通常可以自己配,避免为一个小组分等货。0.5 M NaOH / 1.5 M NaCl,建议用无核酸酶的水新鲜配,NaOH溶液不要放太久。中和液余量够的话,也可自配1.5 M NaCl / 0.5 M Tris-HCl,pH用盐酸调到7.5,高压灭菌后室温保存。我们实验室就是A家盒子用完只补变性液,转尼龙膜效果稳定。20×SSC继续用没问题,注意稀释成2×SSC时查pH。若怕植物基因组高GC区转膜不好,转膜前可用0.25 M HCl做脱嘌呤,但不做也行。
胡
胡勇2284 2026-09-07
如果一定要原配,建议不要找货号整个套装,问售后是否有单组分补充装。原配变性液一般货期短,但价格偏高,可以和代理谈买中和液送变性液或小样。替代货号可在同品牌Southern相关试剂盒里找相同组分,只要COA标明组分一样。保存条件上注意变性液室温避光即可,中和液和20×SSC易长菌,开瓶后分装。若有促销,优先拿大包装中和液,因为变性液消耗快但自配容易,没必要囤原配。
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