应用案例细胞转染 | HL-1小鼠心肌细胞DNA转染案例
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)细胞计数:从培养箱取出细胞,细胞悬液吹打混匀,使用细胞计数仪检测细胞活率及密度。细胞传代(直接稀释法):根据计数结果,将细胞按照5E5 cell/mL左右进行细胞传代。
实验所用试剂清单试剂无水乙醇异丙醇19037ES无内毒素质粒大量提取试剂盒V260401ES动态浊度法内毒素检测鲎试剂耗材50 mL离心管2 mL细心管50 mL离心管架设备Thermo角转子离心机移液器琼脂糖凝胶电泳设备Nanodrop操作步骤01菌体收集、裂解与澄清1.菌体收集: 通过多次离心收集所需要的菌体量。取100 mL菌液分装到2个50 mL离心
实验所用试剂清单试剂19037ES 无内毒素质粒大量提取试剂盒V2转染试剂:40802ES细胞:293T无水乙醇异丙醇耗材50 mL离心管2 mL细心管50 mL离心管架设备Thermo角转子离心机移液器琼脂糖凝胶电泳设备Nanodrop操作步骤01菌体收集、裂解与澄清1.菌体收集: 通过多次离心收集所需要的菌体量。取80 mL菌液分装到2个50 mL离心管
实验所用产品产品名称产品货号Ceturegel®Matrix LDEV-Free基质胶40183ES一、细胞准备与悬液制备细胞培养与状态:使用处于对数生长期、活力> 95% 的人乳腺癌细胞系MCF7。为便于后续活体成像,选用稳定表达荧光素酶或荧光蛋白的细胞株。细胞收集与清洗:使用胰酶消化细胞,用含血清培养基终止消化。将细胞悬液离心,沉淀用无菌预冷的PBS 或
实验所用产品产品名称产品货号Ceturegel®Matrix LDEV-Free基质胶40188ES一、组织样本准备与单细胞悬液制备样本获取与运输:获取患者手术切除的新鲜肿瘤组织样本。样本离体后须在3小时内处理,以确保细胞活性。立即将组织放入含25-30 mL预冷培养基(DMEM,含1% 青霉素-链霉素双抗)的50 mL离心管中,使组织完全浸没。置于碎冰盒中
实验所用产品:产品名称产品货号Ceturegel®Matrix LDEV-Free基质胶40183ES一、细胞准备与悬液制备细胞培养:使用小鼠肺癌细胞系LLC,确保细胞处于对数生长期,状态良好。细胞收集与清洗:使用胰酶消化收集细胞,用含血清培养基中和后离心。细胞沉淀用预冷的PBS清洗1-2次,以去除残留血清。细胞计数与重悬:进行精确细胞计数。根据实验设计每只
皮下成瘤│小鼠肝癌(Hepa1-6细胞系)皮下荷瘤模型构建案例实验所用产品产品名称产品货号Ceturegel®Matrix LDEV-Free基质胶40183ES一、细胞准备与悬液制备细胞培养:使用处于对数生长期的小鼠肝癌细胞系Hepa1-6。细胞消化与收集:使用含0.25% EDTA的胰酶消化细胞,用含血清培养基中和后离心收集。清洗与重悬:细胞沉淀用预冷的
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备获取子宫内膜活检样本,于无菌条件下操作。2.样本清洗使用预冷的PBS缓冲液冲洗活检组织样本,直至冲洗液澄清。样本重量约为1g。3.样本处理将清洗后的子宫内膜组织置于培养皿中,
实验所用产品产品货号40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备获取口腔鳞状细胞癌手术标本,使用生理盐水冲洗表面。在无菌环境下,截取出约1*1*1 cm大小的组织块,用镊子小心去除肉眼可见的坏死组织和主要血管后,放入4℃预冷的含1%双抗的DPBS
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备将8周龄的C57雄性小鼠断颈处死,置于酒精中浸泡5分钟消毒。在无菌操作环境下,截取约8 cm的小肠组织,放入4℃预冷的DPBS溶液中。2.样本清洗使用10 mL DPBS溶液
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备将出生后第2-3天(P2-3)的小鼠断颈处死,体表喷洒酒精消毒。在无菌环境下取出小鼠耳蜗,置于预冷的HBSS缓冲液中。使用精细镊子小心去除附着于耳蜗上的结缔组织与多余组织。2
实验所用产品产品货号40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1. 消化酶配制配制复合消化酶HRA工作液:取4.7 mL无血清基础培养基,依次加入200 μL H液、100 μL R液和30 μL A液,混合均匀。在管身标记名称与日期。2. 样本预处理将肿
实验所用产品产品货号40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1. 样本制备获取卵巢癌手术标本,于无菌条件下操作。使用生理盐水冲洗标本表面。截取约1*1*1 cm的组织块,用镊子小心去除肉眼可见的坏死组织和主要血管后,放入4℃预冷的含1%双抗的DPBS溶液
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备获取子宫内膜活检样本,于无菌条件下操作。2.样本清洗使用预冷的PBS缓冲液冲洗活检组织样本,直至冲洗液澄清。样本重量约为1g。3.样本处理将清洗后的子宫内膜组织置于培养皿中,
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1. 样本制备在无菌条件下,通过显微手术摘取小鼠肝脏组织。2. 样本消化将肝脏组织转移至离心管中,加入适量预热的小鼠正常肝原代组织消化液。消化液体积应为组织体积的3-5倍。随后,将离心管
实验所用产品:产品货号产品名称40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶解冻与稀释:将Ceturegel®基质胶置于冰上,于4°C冰箱过夜完全融化,所有后续操作均在冰上进行。用预冷的无血清培养基按 1:8 比例进行稀释。铺胶:用预冷的枪头垂直吸取 约60 μL 稀释好的