应用案例细胞侵袭 | 大鼠骨肉瘤(UMR106)细胞侵袭实验案例
实验所用产品:产品货号40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶解冻与稀释:将Ceturegel®基质胶置于冰上,于4°C完全融化,所有操作在冰上进行。用预冷的无血清培养基按 1:1 比例进行稀释(注:此比例下基质胶终浓度较高,约4.5-5 mg/mL,适用于侵袭能力较
实验所用产品:产品货号40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶解冻与稀释:将Ceturegel®基质胶置于冰上,于4°C完全融化,所有操作在冰上进行。用预冷的无血清培养基按 1:1 比例进行稀释(注:此比例下基质胶终浓度较高,约4.5-5 mg/mL,适用于侵袭能力较
实验所用产品:产品货号40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶稀释:将Ceturegel®基质胶置于冰上,于4°C完全融化,所有操作在冰上进行。用预冷的无血清 MEM培养基 按 1:8 比例进行稀释(即100 μL 基质胶加入800 μL 无血清培养基),稀释后终浓度
实验所用产品:产品货号40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶稀释与铺板:将Ceturegel®基质胶置于冰上,于4°C完全融化。用预冷的无血清培养基按 1:5 比例进行稀释,轻柔混匀。立即取适量稀释液(约60-100 µL,以均匀覆盖膜面为准)加入Transwell
实验所用产品:产品货号40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶解冻:实验前一日,将Ceturegel®基质胶从-20°C转移至置于冰上,于4°C冰箱过夜,使其完全融化为液态。铺胶与固化:全程在冰上操作,以防止基质胶提前凝固。将适量稀释的Ceturegel®基质胶均匀包
实验所用产品:产品货号产品名称40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶稀释:将Ceturegel® 置于冰上,于4°C完全融化。使用预冷的吸头将其混合均匀。在冰上,用预冷的无血清 1640培养基 按 1:8 比例进行稀释,并立即混匀。铺胶与凝胶化:用预冷吸头吸取 80
实验所用产品:产品货号产品名称40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶准备:将基质胶提前一晚从-20°C放置于冰上,转移至4°C冰箱,过夜融化。实验前,将所需的枪头、EP管等一并预冷。铺胶与凝胶化:全程在冰上操作。用预冷的无血清培养基将融化的Ceturegel®基质胶
实验所用产品:产品货号产品名称40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备试剂预冷:实验前,将Ceturegel®基质胶放置于冰上,于4°C液化。实验前将所需枪头放入4°C冰箱充分预冷。铺胶与凝胶化:全程在冰上操作。用预冷的无血清培养基将基质胶按 1:8 比例稀释,并用预冷枪头
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻:实验前,将Ceturegel®基质胶放置于装有碎冰的冰盒中,于4℃冰箱过夜解冻。全程低温操作:实验开始后,所有涉及基质胶的步骤需在冰上操作。将预冷的24孔板、枪头及融化的基质胶置于冰盒中。铺板与聚合:
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板材料准备:准备好实验所需材料,包括Ceturegel®基质胶、24孔板、HUVEC细胞、以及预冷的枪头和EP管。全程低温操作:实验开始前,将Ceturegel®基质胶放置于装有碎冰的冰盒中,于4℃冰箱过夜解冻。将
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻:实验前,将Ceturegel®基质胶放置于装有碎冰的冰盒中,于4℃冰箱过夜解冻。全程低温操作与铺板:所有步骤在冰上进行。使用预冷的枪头,取 200µL 融化的基质胶原液,加入预冷的24孔板孔底中央。用
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻:实验前,将Ceturegel®基质胶放置于装有碎冰的冰盒中,于4℃冰箱过夜解冻。全程低温操作:实验开始前约1小时,将24孔板和枪头预冷。所有涉及基质胶的步骤在冰上进行。铺板与聚合:使用预冷的枪头,向2
实验所用试剂设备清单货号产品名称18701ESMolPure® Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA fast Kit 通用全血/细胞/组织/细菌DNA快速提取试剂盒10406ESRNase A 核糖核酸酶A(100 mg/mL)—无水乙醇实验前准备1.需要自备乙醇,异丙醇,1×PBS,RNaseA。2.开始实验前将需要的水浴先预热到
实验所用试剂设备清单货号产品名称18701ESMolPure® Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA fast Kit 通用全血/细胞/组织/细菌DNA快速提取试剂盒10406ESRNase A 核糖核酸酶A(100 mg/mL)—无水乙醇实验前准备1.需要自备乙醇,异丙醇,1× PBS,RNaseA。2.开始实验前将需要的水浴先预热
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶轻轻吹打下细胞。终止:加入2-3
插入片段信息片段长度441 bp片段浓度20 ng/μL片段纯化方式琼脂糖凝胶电泳切胶纯化回收载体信息载体长度3000 bp载体浓度50 ng/μL载体纯化方式琼脂糖凝胶电泳切胶纯化回收反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix10 μL片段1 μL载体1.2 μL无菌超纯水7.8 μL50℃反应
插入片段信息片段长度1104 bp片段浓度51 ng/μL片段纯化方式琼脂糖凝胶电泳切胶纯化回收载体信息载体长度3000 bp载体浓度50 ng/μL载体纯化方式琼脂糖凝胶电泳切胶纯化回收反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix10 μL片段1.3 μL载体1.2 μL无菌超纯水7.5 μL50
插入片段信息片段长度1800 bp片段浓度50 ng/μL片段纯化方式琼脂糖凝胶电泳回收载体信息载体长度7200 bp载体浓度20 ng/μL载体纯化方式琼脂糖凝胶电泳回收反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix5 μL片段1 μL载体4 μL无菌超纯水0 μL50℃反应5分钟。克隆生长情况阳性
插入片段信息片段长度1011 bp片段浓度65 ng/μL片段纯化方式片段扩增胶回收载体信息载体长度10000 bp载体浓度13 ng/μL载体纯化方式载体酶切纯化反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix5 μL片段1 μL载体4 μL无菌超纯水0 μL50℃反应5分钟。克隆生长情况阳性克隆鉴定
插入片段信息片段长度1000 bp片段浓度270 ng/μL片段纯化方式试剂盒纯化载体信息载体长度10000 bp载体浓度35 ng/μL载体纯化方式试剂盒纯化反应体系及程序组分体积(μL)2×HieffClone®Universal IIEnzymePremix5 μL片段0.5 μL载体4.5 μL无菌超纯水0 μL50℃反应30分钟。克隆生长情况左为翌