Applications蛋白酶抑制剂/磷酸酶抑制剂--清除酶的诱惑
——清除酶的诱惑
在平衡状态下内源性蛋白质产生并降解,因此其细胞水平是稳定的。当在体外从细胞和组织中提取蛋白质时,与蛋白一起释放出来的还有许多能够降解提取物中的蛋白质的内源酶,例如磷酸酶和蛋白酶。此时由于蛋白质产生被显著抑制,降解继续,因此这些酶可以快速降解提取物中的蛋白。为了防止蛋白纯化过程中目的蛋白不受蛋白酶的破坏,需要加入蛋白酶抑制剂对其进行活性抑制。
另外,细胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信号转导、细胞增殖、细胞分化和细胞凋亡等许多重要的生物学活动的调控开关。在研究蛋白磷酸化途径和信号通路的过程中保护蛋白磷酸化状态是极其关键的。因此在蛋白研究过程中,对磷酸酶作用的控制具有重要的生理意义。
翌圣生物不断开拓创新,通过蛋白分子结构的定向设计与大规模酶蛋白的突变筛选,为客户提供性能卓越的蛋白酶及磷酸酶抑制剂产品。
蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)从广义上指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白变性的物质。从放线菌发酵液中分离到亮肽素、抗痛素、糜蛋白酶抑素、抑弹性蛋白酶醛、抑胃蛋白酶素、磷酰胺素等,能分别抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、胃蛋白酶、金属蛋白酶等各种蛋白酶。都属于蛋白酶抑制剂。
抑制剂 | 成分 | 抑制类型 |
蛋白酶抑制剂 | AEBSF(Cat#20111ES) | 丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂 |
Aprotinin(Cat#20105ES) | 丝氨酸蛋白酶的竞争性可逆抑制剂 | |
Bestatin(Cat#20132ES) | 氨基肽酶可逆抑制剂 | |
E-64(Cat#20129ES) | 半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂 | |
Leupeptin(Cat#20112ES) | 丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制剂 | |
天冬氨酸蛋白酶可逆抑制剂 | ||
EDTA(Cat#60126ES) | 金属蛋白酶的可逆抑制剂 | |
1,10-Phenanthroline | 金属蛋白酶的可逆抑制剂 | |
Phosphoramidon | 金属蛋白酶的可逆抑制剂 | |
磷酸酶抑制剂 | Cantharidin | 蛋白磷酸酶2A可逆抑制剂 |
(-)-p-bromotetramisole oxalate | 碱性磷酸酶不可逆抑制剂 | |
Microcystin-LR | 蛋白磷酸酶1和蛋白磷酸酶2A可逆抑制剂 | |
sodium orthovanadate(Cat#20133ES) | 碱性磷酸酶和酪氨酸磷酸酶可逆抑制剂 | |
sodium molybdate | 酸性磷酸酶不可逆抑制剂 | |
sodium tartrate | 酸性磷酸酶可逆抑制剂 | |
imidazole | 碱性磷酸酶可逆抑制剂 | |
sodium fluoride | 酸性磷酸酶可逆抑制剂 |

不同类型的蛋白提取物中含有不同类型的蛋白酶。例如,哺乳动物细胞提取物中通常含有高丰度的丝氨酸蛋白酶,细菌细胞提取物通常含有较多的丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶,植物提取物中常含有大量的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶,还有一些含有天冬氨酸蛋白酶。另外,由于AEBSF会导致质谱峰漂移,含AEBSF的蛋白酶抑制剂不适合用于质谱(Mass Spectrometry, MS)检测和分析。为此翌圣生物针对不同类型样品的蛋白提取及后续的实验用途,提供了不同类型的蛋白酶、磷酸酶以及抑制剂混合物以供选择,具体采购信息见订购详情。
货号 | 名称 | 组分 | 规格 |
20123ES | 包含AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、Pepstatin A多种成分 | 1瓶(10片)/1瓶(50片) | |
20124ES | 包含AEBSF、Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin、Pepstatin A多种成分 | 1 mL/10×1 mL/100×1 mL | |
20134ES | 包含AEBSF、E-64、Pepstatin A、1,10-phenanthroline | 1 mL | |
20135ES | (用于His-Tag蛋白纯化),EDTA-free, 100×DMSO储液 | 包含AEBSF、Bestatin、E-64、Pepstatin A、Phosphoramidon Disodium Salt | 1 mL |
20136ES | 包含AEBSF、Bestatin、E-64、Leupeptin、Pepstatin A、1,10-Phenanthroline | 1 mL | |
20137ES | 包含AEBSF、Bestatin、E-64、Pepstatin A和单独包装的EDTA | 2 mL | |
20138ES | 包含Aprotinin、Bestatin、E-64、Leupeptin 和单独包装的EDTA | 2 mL | |
20109ES | A管含有Cantharidin、Bromotetramisole、Microcystin-LR。 B管含有Sodium orthovanadate、Sodium molybdate、Sodium tartrate、Imidazole 、 Sodium Fluoride。 | 2 mL/10×2 mL/100×2 mL | |
20140ES | 包含Trichostatin A、EX-527、Nicotinamide、Sodium Butyrate | 1 mL | |
20104ES | 1 g/5×1 g |
以上产品均可用于WB,Co-IP,Pull-down assay,IF,IHC,激酶研究等多种分析。
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
抑制效果不佳 | 样品含有较高的蛋白酶 | 溶解该蛋白酶抑制剂片剂时提高其浓度 |
该片剂对特定的蛋白酶家族没有较好的抑制效果 | 该片剂中不包含该家族蛋白酶抑制剂组分 | 向蛋白体系中加入抑制该家族蛋白酶的抑制剂 |
起到抑制该家族的蛋白酶抑制剂组分浓度较低 | 溶解该蛋白酶抑制剂片剂时提高其浓度 |
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