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News重磅！突破性AAV转染新神器——病毒滴度提高2倍！

📂 细胞转染 Type ID 5005

👁 16,562 views 🗓 2026-10-13 Source ID：3642

有效降低了AAV制备成本!

Source: Yeasen Biotech ｜ Original: https://www.yeasen.com/solutiondetail/3642 ↗

CGCS 2024（第五届）国际细胞与基因治疗中国峰会暨展览会于2024年5月22-24日在南京扬子江国际会议中心召开。翌圣生物研发科学家滕以刚博士受邀参加并在会议上进行了“翌圣生物新型PEI转染试剂在AAV大规模生产中的应用”的主题报告：为我们介绍了翌圣生物自主研发的新型Ultra PEI-AAV转染试剂，该产品专为悬浮体系中制备高滴度AAV而设计；翌圣生物的Ultra PEI-AAV转染试剂以其卓越的产品性能和高转染效率，AAV病毒滴度可提升2倍左右，有效降低了AAV制备成本。

截至目前，共有14种体外基因疗法和29种体内基因疗法通过FDA获得批准。由于AAV具有低免疫原性、广泛的趋向性和非整合性等特点，腺相关病毒（AAV）载体已成为临床试验和 FDA 批准申请的首选^[1]。

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高转染效率

针对不同AAV血清型均能获得极高的病毒滴度

Ultra PEI-AAV转染试剂与PEI及其他竞品相比，在悬浮293F细胞中分别生产AAV2/AAV5/AAV8/AAV9，可以大幅度提高AAV产量，且病毒产量显著高于竞品；针对不同血清型均有很高转染效率。

DNA用量为1ug/百万细胞，转染后72h收取病毒，检测病毒原液；转染试剂和质粒的比例均是按照1:1进行实验

低使用成本

更少的质粒及转染试剂仍能获得高滴度AAV

在悬浮体系中进行AAV病毒载体的大规模生产时，转染试剂和质粒的用量是影响生产成本的关键因素。Ultra PEI- AAV转染试剂，当质粒和转染试剂的使用量减少至一半，对病毒产量的影响较小，能够有效控制并降低大规模生产的成本。

在悬浮293F细胞中生产rAAV8，DNA用量分别为0.5 μg 、0.75 μg 、1 μg/百万细胞，转染后72 h收取病毒；转染试剂和质粒按照1:1进行试验

优化后复合物体积可低至1%，工艺放大更方便

在大规模瞬时转染中，转染复合物比例过高会给生产带来挑战。翌圣生物的Ultra PEI-AAV转染试剂经过工艺优化，成功将转染复合物体积降至1%，极大地便利了大规模AAV病毒载体的生产。优化后的转染复合物不仅易于制备，而且有效解决了传统大规模生产中因体积限制而带来的挑战，为AAV病毒载体的商业化生产提供了强有力的支持。

在悬浮293F细胞中生产rAAV8，转染72 h后收取病毒

复合物可稳定6 h以上，大规模生产更加便利

在大规模瞬时转染中，生产工艺往往要求在限定的时间内高效地制备大量的转染复合物，并将这些复合物加入到悬浮培养的细胞中，以实现高效的细胞转染。翌圣生物的Ultra PEI- AAV转染试剂与质粒结合形成的转染复合物，经过工艺优化后，能在6小时内保持高稳定性，同时不影响AAV病毒滴度，充分满足了大规模AAV制备的工艺需求，保证了生产过程的高效性和连续性。

在悬浮293F中生产AAV8，转染72 h后收取病毒

翌圣生物的Ultra PEI- AAV转染试剂在与市场上的主流产品相比时，具有以下显著优势：

病毒滴度显著提高：在病毒产量上实现了显著提升，对于AAV2、AAV5、AAV8和AAV9等多种血清型，均能实现2倍左右的病毒滴度增长。
降低使用成本：该产品通过减少50%的DNA和转染试剂用量，仍然保持高产量，有效降低了生产成本。
工艺放大更方便：转染复合物的体积经过优化后可降至1%，并且具有长达6小时的稳定性，这些特性共同为大规模AAV病毒载体的制备提供了极大的便利和成本效益

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转染试剂选择指南

货号	40801ES	40802ES	40807ES	40809ES	40810ES	40821ES	40824ES	40825ES	40828ES	40829ES	40830ES
产品名称	LipoBooster 3000转染试剂	Liposomal 2000脂质体转染试剂	RNAiBoost 转染试剂	mRNA 转染试剂	昆虫细胞转染试剂	PEI -GMP 转染试剂	UltraAAV- GMP转染试剂	UltraLV 转染试剂	UltraProFect-CHO瞬转表达试剂盒	UltraProFect-293瞬转表达试剂盒	UltraProFect蛋白瞬转表达转染试剂
细胞类型	常规细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞	昆虫细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞
	难转染		难转染	难转染
	原代		原代	原代
	干细胞		干细胞	干细胞
核酸类型	DNA	DNA			DNA	DNA	DNA	DNA	DNA	DNA	DNA
	siRNA		siRNA
	miRNA		miRNA
	ASO		ASO
	mRNA			mRNA
应用场景	用于各种核酸及原代等难转染细胞系	普遍用于多种细胞DNA转染	用于siRNA和miRNA转染，在多种难转染细胞上均能高表达	mRNA转染专用，在多种难转染细胞上均能高表达	针对sf9和High Five等昆虫细胞进行杆状病毒及质粒DNA转染	通用型病毒包装转染试剂（适用于LV及AAV）	AAV病毒包装专用转染试剂	LV慢病毒包装专用转染试剂	CHO悬浮细胞瞬转表达蛋白、抗体，含转染试剂、培养基、补料	293悬浮细胞瞬转表达蛋白、抗体，含转染试剂、培养基、补料	用于抗体、蛋白、细胞因子等瞬转表达，满足CHO及293悬浮细胞系需求
对标竞品	thermo-lipo3000	thermo-lipo2000	thermo-RNAiMAX	thermo-Messenger MAX	thermo-Cellfectin	polyplus-PEIpro GMP	polyplus-FectorVIR-AAV GMP/ PEIpro	polyplus-FectorVIR-LV/PEIpro	thermo-ExpiCHO 瞬转试剂盒	thermo-Expi293 瞬转试剂盒	polyplus-FectorPRO

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参考文献

[1] Wang JH, Gessler DJ, Zhan W, Gallagher TL, Gao G. Adeno-associated virus as a delivery vector for gene therapy of human diseases. Signal Transduct Target Ther. 2024 Apr 3;9(1):78. doi: 10.1038/s41392-024-01780-w. PMID: 38565561; PMCID: PMC10987683.

[2] Srivastava, A., Mallela, K. M. G., Deorkar, N. & Brophy, G. Manufacturing challenges and rational formulation development for AAV Viral vectors. J. Pharm. Sci.110, 2609–2624 (2021).

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