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Applications非洲猪瘟病毒(ASFV)——全预混/直扩qPCR解决方案

📂 病原检测 Type ID 5003

👁 16,742 views 🗓 2026-10-12 Source ID：801

非洲猪瘟病毒(ASFV)——全预混/直扩qPCR解决方案

Source: Yeasen Biotech ｜ Original: https://www.yeasen.com/solutiondetail/801 ↗

非洲猪瘟（ASF）是由非洲猪瘟病毒（ASFV）感染家猪或野猪引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病，其发病率和死亡率可达100%，严重危害着全球养猪业，造成难以估量的经济损失。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。

目前非洲猪瘟还未有疫苗和有效的治疗手段，通过实验室诊断方法对非洲猪瘟进行快速、准确的诊断，对于防止疫病的传播至关重要。在实验室检测技术中，qPCR法是OIE推荐使用的非洲猪瘟常规诊断的重要工具，也是中国在现阶段非洲猪瘟流行情况下首选的检测技术。

图1. Yeasen非洲猪瘟qPCR产品

产品优势：

操作高效便捷——预混合Mix，无需繁琐操作，一步添加

检测灵敏度高——基因改造的抗体法热启动 Taq 酶，3 copies/反应稳定检出，高灵敏度助力精准“拔牙”

预混稳定性强——预混37℃放置7天、反复冻融性能稳定

试剂批间差小——4个不同批次进行20次重复，CV＜1%

血液耐受性好——可耐受抗凝剂样本（EDTA、柠檬酸钠）及0.5%全血

多平台均适用——Bio-Rad CFX96、ABI Q5及Slan均适配

ASFV检测解决方案一：

UDG全预混qPCR，超强稳定性

产品搭配：磁珠法拭子样本病毒DNA/RNA提取试剂盒（Cat#18300）+超强全预混稳定性qPCR试剂（Cat#13171）

1.MolPure® Magnetic Swab Viral DNA/RNA Kit（Cat#18300）

2.Hieff Unicon® C55P1 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix（UDG plus）（Cat#13171）

产品优势：

1.UDG防污染体系

2.超强全预混稳定性

3.高扩增效率，重复性好

4.多平台多体系适用

案例展示：

超强全预混稳定性

将Cat#13171配制成含引物探针的全预混液，分别在37℃放置7天，反复冻融15次，对ASF质粒体系进行扩增。结果证明，37℃放置7天，对Ct值和灵敏度均无任何影响，且反复冻融15次后Ct值无明显变化。

图2. Yeasen（Cat#13171）全预混37℃及冻融稳定性稳定性

试剂稳定，重复性好

选取Yeasen 探针法qPCR Mix 4个不同批次做20次重复试验，对非洲猪瘟ASFV质粒体系进行扩增，发现Ct值无明显差异，CV小于1%。

图3. 重复性测试

多平台，多体系适用

分别使用Yeasen qPCR Mix在Bio-Rad CFX96、ABI Q5及Slan平台上对非洲猪瘟ASFV/ACT双质粒进行扩增，可以看到Yeasen qPCR Mix适配各种机型的仪器，且数据可靠稳定。

1.Bio-Rad CFX96 Real-Time PCR System

2.ABI Q5 Real-Time PCR System

3.Slan Real-Time PCR System

图4. 不同机型下的qPCR结果

ASFV检测解决方案二：

免提取直扩qPCR，操作更便捷

产品搭配：核酸释放剂（Cat#13720）+耐抑制qPCR预混液（Cat#11211）

1.Nucleic Acid Release Reagent V2 （Cat#13720）

产品优势：

1.一步法免提取，无需加热或提取纯化

2.样本适用范围广，血清、血浆、肺泡灌洗液及拭子样本均可

3.快速裂解，室温仅需10min

4.可室温运输和保存，4℃长期储存，适合基层养殖场

2.Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix （Cat#11211）

产品优势：

1.血液杂质耐受性强

2.超高灵敏度

3.超强稳定性

案例展示：

血液杂质耐受性强，应用范围广

分别检测Yeasen 探针法qPCR Mix及各品牌qPCR试剂对血液样本中抑制物的耐受性，结果发现，对于EDTA、柠檬酸钠，Yeasen 探针法qPCR Mix显示有很高的耐受性，且可以耐0.5%的全血。

图5. Yeasen（Cat#11211）及各品牌同类型试剂在不同血液杂质背景中的耐受能力表现

超高灵敏度，3copies/反应稳定检出

使用ASFV引物探针，对ASFV单质粒(终体系3 copies)进行20个复孔的检测,比较各个品牌试剂的检出率，可以看到Yeasen产品的检出率更高。

图6. ASFV单质粒（终体系3 copies，20个复孔）检出率比对

超强稳定性，7天性能稳定

非洲猪瘟ASFV/ACT双质粒体系，在4℃、25℃和37℃下分别放置7天后，Ct值和荧光值不变化，性能稳定。

图7. ASFV单质粒稳定性

ASFV检测解决方案三：

等温扩增PCR，快速更高效

产品搭配：Bst DNA Polymerase（Cat#12908）+热敏UDG酶（Cat#10303）

1.Bst DNA Polymerase Bst DNA聚合酶（Cat#12908）

产品优势：

1.高扩增效率

2.高产量扩增

3.dUTP耐受性

2.Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile,1 U/μL （Cat#10303）

产品优势：

1.对温度敏感、易于灭活

2.较常规UDG酶大幅度降低对含dU扩增产物的降解作用

案例展示：

使用翌圣和进口品牌N*的同类型Bst DNA聚合酶，扩增结果表明Ct值和荧光强度无显著差异。

完美替代进口品牌N*产品

图8. 不同品牌同类型Bst DNA聚合酶的扩增曲线

产品订购

类型	描述	名称	货号
样本提取试剂	直扩免提取	MolPure^® Magnetic Swab Viral DNA/RNA Kit	18300ES
样本提取试剂	磁珠法提取	Nucleic Acid Release Reagent V2	13720ES
检测预混液	全预混（含UDG）	Hieff Unicon^® C55P1 TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)	13171ES
检测预混液	耐抑制高灵敏度	Hieff Unicon^® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix	11211ES
单酶	等温扩增	Bst DNA Polymerase	12908ES
单酶	热敏UDG酶	Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile	10303ES

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类型	描述	名称	货号
单酶原料	可冻干等温扩增	Bst DNA 聚合酶（无甘油）	12909ES
单酶原料	热启动Taq酶	HieffUNICON^® HotStartDirectTaqDNAPolymerase	10717ES
Taq酶抗体	Taq酶双封闭抗体	Hieff^® Double-Block anti-Taq DNA Polymerase Antibody	31303ES
	聚合酶活性封闭抗体	Hieff^®anti-Taq DNA Polymerase Antibody Taq酶单克隆抗体	31301ES
	外切酶活性封闭抗体	Hieff^® anti-exonuclease of Taq Antibody Taq酶5'→3'外切酶单克隆抗体	31302ES

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