Q:
19201ES提取的 RNA 有基因组 DNA 污染?
(1) 向裂解液中加入氯仿后,需要在低温下(2-8℃)高速离心。离心后,RNA 被抽提到上层的水相中,中、下层是有机相,含有氯仿,DNA 即存在于中层。氯仿在常温下会与水以一定比例互溶,因此,常温离心会导致上层水相中也有少量基因组DNA 的污染。吸取上层液体时, 应非常小心,避免吸到中间层和下层;(2) RNA 样品中的少量基因组 DNA 残留,也可以通过后续逆转录反应前的基因组去除步骤进行去除。
19201ES提取的 RNA 有基因组 DNA 污染?
(1) 向裂解液中加入氯仿后,需要在低温下(2-8℃)高速离心。离心后,RNA 被抽提到上层的水相中,中、下层是有机相,含有氯仿,DNA 即存在于中层。氯仿在常温下会与水以一定比例互溶,因此,常温离心会导致上层水相中也有少量基因组DNA 的污染。吸取上层液体时, 应非常小心,避免吸到中间层和下层;(2) RNA 样品中的少量基因组 DNA 残留,也可以通过后续逆转录反应前的基因组去除步骤进行去除。