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本试剂盒使用更为简便，只需吸取 1μL 疑似支原体污染的细胞培养上清加入反应体系中，先将样品在 25~37 ℃放置 5 min，再在水浴锅或 PCR 仪中，恒温 63 °C 孵育 60 min。观察反应液由蓝紫色变成天蓝色，结果肉眼可辨，无需电泳。

支原体试剂盒在乙醇、DMSO 有机溶剂，以及强酸强碱环境中，不稳定易变性，导致颜色变色为天蓝色。这款试剂盒只能用于细胞检测，不可用于有机溶剂、强酸强碱环境下检测。

GMyc-PCR 支原体检测方法通过巢式 PCR 的方式获得检测结果。整个实验由 2 轮PCR 组成，检测结果以第二轮为准。

检测原理是巢式PCR(2轮扩增，以第2轮结果为准)，支原体16S-23SrRNA序列保守区域设计，只特异性扩增支原体DNA。

可以的，如果使用细胞悬液做样品，则需要提取DNA后再进行 PCR。加入量一般为反应体系 1/10 的量或更少。

一步法恒温检测试剂盒检测的支原体的种类是 22 种，而 PCR 检测方法检测的是常见的 12 种支原体。样品中污染的支原体可能不包括在 PCR 法检测的支原体种类内。

PCR 法的灵敏度高于一步法检测，一步法的灵敏度是 10^3 个拷贝，而一步法检测的细胞支原体种类为22种，多于 PCR 法。

静脉注射时需要依据动物的体重，不能超过 0.1ml/10g，但是进行腹腔注射可以适当的增加注射的体积。皮下注射需要根据注射位点的容量进行决定。

该试剂不能冷冻，如已冻凝则不能再使用。

是的，阴离子的。

是的，是指Clodronate药物的浓度。

没有其他成分。

推荐使用空白脂质体对照，也可以使用PBS作为对照。

因为整体实验在EP管中进行，样品太多，会导致最开始加样完成的样品和最后一个样品之间出现一定的时间差，可能会影响最终实验结果，故说明书建议不要超过3个样品。

氯磷酸脂质体都是大批量的生产，每批次都会对氯磷酸的浓度以及一些可能的污染物进行检测，确保无误后才会销售。脂质体容易收到极端温度的影响。正确的运输和储存方式是4~8℃，悬液既不能被冻存，也不能被加热超过 30℃。自收到货物起，需要在3个月内使用完，不然有可能会影响使用的效果。

结合要做的靶标蛋白，如为细胞膜蛋白，建议先做免疫荧光，再做TUNEL。如非细胞膜蛋白可先做TUNEL，再进行免疫荧光。

当存在非特异性染色较大可能是因为时间太久或者是试剂浓度太高导致的。建议降低染色液浓度或减少染色时间。

Annexin V-PE建议使用PE通道；7-AAD建议使用561nm激发的PerCP‑Cy5.5或PC5.5通道。

首先要确定实验中使用的诱导剂是否能产生凋亡。可通过设设置凋亡诱导的阳性药物对照来排除这一情况。Annexin V-PE 染色失败，最常见的实验操作原因是贴壁细胞消化不当。Annexin V 跟 PS 的结合需要 Ca2+，Binding Buffer 中含有 2.5 mM 的 Ca2+，含 EDTA…

实验中发现未经诱导凋亡的对照细胞经染色后Annexin V-PE/7-AAD 双阳性比例过高，造成这种结果的原因可能是细胞本身活力低。建议用台盼蓝染色计算细胞活力，阴性对照台盼蓝拒染的细胞应大于 95%。若细胞活力低，建议重新复苏细胞，通常刚复苏的细胞至少应传代 2-3 次以后才能进行实验。另一可能…