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Q:重力柱装柱流程?

装柱流程如下:第一:准备重力柱;第二:将白色小垫片塞入重力空柱中,垫片可用20%乙醇湿润;第三:首先确认需要装入填料体积,移液枪将填料和缓冲液一起加入重力柱中;第四:将上垫片塞入填料上面固定填料(此步骤也可以不做),然后利用平衡液平衡填料。

蛋白纯化 👁 110
Q:纯化柱反压过高是什么原因?

可能原因如下:1.样品中含高浓度的核酸,建议延长破碎时间直至粘度降低,或添加DNaseI;2.缓冲液太黏稠,有机试剂或蛋白稳定试剂(如甘油等)可能会引起反压增高, 降低操作流速。3. 填料被堵塞,裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上样前最好用 0.22µm 或0.45µm 滤膜过滤,或离心去除。

蛋白纯化 👁 70
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