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可以，建议如果条件允许最好是使用荧光显微镜或共聚焦显微镜或流式细胞仪进行检测。

建议染色后应立即进行观察，应当在 30min 内完成整个实验观察过程。

如果试剂盒内提供有稀释 buffer，应使用该溶液配置，如果没有配备，可以使用 HBSS 无血清培养基 PBS 等合适的缓冲液进行配置。

如果是爬片观察，添加的剂量应是尽量浸没细胞为宜，如果采用流式观察使用剂量可以参考说明书建议的用量。

可以，但是需要制备原生质体，因为植物细胞或是细菌（原核生物）含有细胞壁，具体的染液使 用剂量只需浸没细胞即可，染色时间对于不同细胞有一定的不同。

需要，因为 TdT 酶需要经过通透的细胞才能进入细胞内，而 Annexin V 和JC-1 是不能进行染色固定的。

不需要，对于贴壁细胞，要先用 PBS 洗 2-3 次，然后直接用多聚甲醛固定细胞，在通透处理，染色观察。

荧光显微镜 共聚焦显微镜 流式细胞仪 荧光酶标仪均可以检测tunel 荧光信号。

荧光基团长期暴露在普通光照下，会发生严重淬灭现象，因此在实验操作上应尽量避光操作和孵育。

使用乙醇或甲醇固定会导致标记的效率较低。酸性固定液，也容易导致假阳性的出现。建议采用新鲜配置的 4%中性多聚甲醛固定液。

保质期是一年，请按照说明书正确存放，并在试剂盒标签上的EXP日期之前使用。

对于荧光较弱的情况可以适当的增加孵育时间和工作液浓度。

可能是使用浓度过高造成，可以再适当降低一些试剂浓度；可以在寻找视野时使用低能量的激光，待找到合适视野时使用高能量激光激发观察。

Annexin V浓度为0.4 mg/ml，PI浓度为20 ug/ml。

细胞样本可以，组织样本也可以，但该试剂盒检测的是EdU，无论细胞还是组织样本，都需要提前掺入EdU才可以进行检测。

BrdU 免疫检测需要变性DNA后才能与抗体结合，而 EdU 因为其特有的炔羟基团可以与一些荧光染料发生“Click”化学反应，无需变性就能标记上荧光，因此应用更广泛。

不可以。虽然 EdU 是对活细胞进行代谢标记，但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型，检测信号时的Click 反应必须在固定和通透的样品上进行。

叠氮化物和炔烃类间 Click 反应非常有选择性，生物体内几乎不可能有副反应发生，所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA 洗涤的次数。同时， 也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click 反应对照，以排除自发荧光干扰。此外，还可在无 EdU 体系中进…

请保证试剂使用时为无色的状态，不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液；为确保 Click 反应试剂能够到达核内，细胞需要充分地固定和通透；由于铜离子能结合到部分试剂上，这会导致催化 Click 反应的有效浓度降低。所以在 Click 反应前，不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂（例如 EDTA、EGTA…

分装保存在-20 ℃冰箱中，可稳定保存 1 个月。