可以用热水。但建议优先用少量甲醇溶解。
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G250 灵敏度低,检测下限是 0.5 µg,但是检测快,显色清楚,且不需要褪色处理; R250 灵敏度高,检测下限 0.1 µg 蛋白,但是检测相对慢,需要褪色处理。
DTT 粉末的稳定性很高,但是工作液必须现配现用,多余液体需丢弃。
可在蛋白电泳(SDS-PAGE)和 Western blotting 中作为标准参照。
可通过考马斯亮蓝染色、银染或其他蛋白染色方式观察条带。银染相比于考马斯亮蓝染色更灵敏,在使用时应降低Marker 上样量。
变性完的一周内用完,所以建议要用的时候再变性,不可永久使用。
必须完全溶解后再使用。沉淀可能是储存时低温下溶解度下降析出结晶,属正常物理现象,不影响试剂功能,可在室温或不超过 37°C 的水浴中溶解,
不可以。在室温或不超过 37°C 的水浴中溶解 5×SDS-PAGE 上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
不会的。5×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液中 SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖,因此,电泳速度只是与其分子量大小有关。
因为loading里面的染料染料会发生聚集,不同的聚集度会有不同的分子量,所以可能会有分层的现象。
本产品不含 SDS 等变性试剂,但是含有还原性试剂 DTT。
该产品可用于常规的非变性聚丙烯酰胺(PAGE)蛋白电泳样品上样。
按照每 4 μl 蛋白样品加入 1 μl 5×非变性蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和 5×非变性蛋白上样缓冲液。
不可以。在室温或不超过 37°C 的水浴中溶解 5×非变性蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
本产品不含 SDS 等变性试剂,也不含 DTT、β-巯基乙醇等还原性试剂。
该产品可用于常规的非变性非还原性聚丙烯酰胺(PAGE)蛋白电泳样品上样。
不可以。在室温或不超过 37°C 的水浴中溶解 5×非变性非还原蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
按照每 4 μl 蛋白样品加入 1 μl 5×非变性非还原蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和 5×非变性非还原蛋白上样缓冲液。
请 37ºC 温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如沉淀伴随浑浊、异味,发现细菌污染,则应丢弃,避免对实验结果造成影响。
BSA 溶解需要使用试剂盒自带的蛋白标准配制液,后续标准品的稀释可以使用水溶液。