棉花,松类,银杏;香蕉和葡萄的果肉;小麦和花生的种子;菇类真菌等。
植物样本RNA含量丰富,建议提高RNase A量进行处理。
研磨裂解不充分或者裂解物太粘稠,建议降低初始样本量。
样本量太高,建议初始材料不要过量,后续多漂洗几次。
可能是提取产量低、DNA 出现降解或者纯度低。DNA 提取实验包括样本预处理及 DNA 提取两个环节,涉及到提取材料的新鲜程度、样本裂解-核酸的释放方式、柱结合能力等多个关键点。
DNA的大小分布变化范围很大,主要取决于原始样本DNA的质量。一般固定时间越长,DNA损伤断裂越严重,片段越短。Q:
没有配置 carrier RNA。
可以用于细胞样本DNA提取。处理方法为:培养成熟的动物细胞:1,000rpm离心3min,收集细胞。建议单次提取细胞量不超过5×106个培养细胞。如果细胞量较少,可以提高转速到13000rpm,之后收集细胞沉淀按说明书操作,加入相应裂解液。
可以,需要客户去除坚硬的外壳后再进行 DNA 的提取。
样本过多或没有充分裂解;洗脱不充分。
不建议用于冰冻组织,若需要保护冰冻组织内 RNA 的完整性,可使用我司的 RNAsafe-ICE冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液(货号:10605ES60),即可将冰冻组织恢复为匀浆用的组织状态,并进行后续的RNA提取,也可以置于-20℃长期保存,维持RNA的稳定性。
在37℃下可稳定1天, 25℃下1周, 4℃下1个月, -20℃或-80℃下可以长期保存。
需要在4℃充分浸润后冻存保存,可以过夜浸润。
19201是浓缩形式,需要的试剂用量更少一点,提取的准确性和提取反应的速度更快一些。一般10606就可以满足常规提取需求,如果客户需求更好的提取效果和rnase抑制效果可以用19201。
这并不意味着裂解不完全。此时,细胞膜实际已完全裂开,并释放RNA,继续后续实验即可。
可根据具体批次的孔尼茨单位(Kunitz Units)计算。如15KU规格的DNaseⅠ,质量约为7.5mg,计算方法为(15KU÷孔尼茨单位)=(15000 Kunitz Units÷≥2000Kunitz Units/mg protein)=7.5mg。
最好快速用完,或者现配现用。-20℃保存。
常用于清除蛋白中的DNA,或者用于向DNA 中引入缺口使标记碱基插入DNA。
10607 以含氯化钙的冻干粉形式供应;10608 以粉末形式供应。两者用途一样,用于清除蛋白中的 DNA。
Kunitz Units和U是不同的单位,不能直接换算,它的酶活就是Kunitz Units不是U,是孔尼茨单位,不能换算的。如果是要要加入150U是没法计算的,但如果是要150 Kunitz Units,可以根据每个批次的COA上的测试的酶活情况计算。比如,某批次酶活是2500Kunitz Uni…