OnePot DNA 建库试剂盒可实现片段化、末端修复/A 尾添加、接头连接三步一管完成建库。具体对应建库模块及替代方案如下：（1）片段化/末端修复/加 A 模块：可使用货号 12609 试剂盒完成；（2）接头连接模块：可使用货号 12607 试剂盒完成；（3）文库扩增模块：可使用货号 12621…
12620ES 适合用于甲基化样本的扩增。本产品针对甲基化样本的扩增需求进行了优化，可有效实现甲基化样本的特异性扩增，满足相关实验研究的要求。
本产品相较于 2 Super Canace Ⅱ High-Fidelity Mix 的优势体现在：（1）完全克服了常规高保真酶无法以 dUTP 为原料进行聚合反应的问题；（2）可兼容含有 dUTP 的扩增引物；（3）可使用含有 dUTP 的 DNA 作为扩增模板。
连接反应中若连接buffer混合不充分（如未充分混匀），可能导致酶与底物接触不充分，进而影响连接效率，最终造成文库产量降低。为确保连接反应混合均匀，建议通过以下方式操作：（1）将反应管上下颠倒10 次；（2）使用漩涡混合器短暂混匀3 秒。
12606（Canace）可修复的损伤包括：（1）胞嘧啶脱氨成尿嘧啶（C→U）；（2）碱基氧化损伤；（3）3’端封闭损伤；（4）切刻（nick）损伤；（5）gap（缺口）损伤。目前暂不支持修复DNA片段化和DNA-蛋白质交联等损伤。
本公司优化的试剂可有效降低突变假阳性率，提升文库产量，并降低嵌合reads数等，以确保实验结果的准确性与可靠性。
Coverage（基因组覆盖度）是指测序获得的序列占整个基因组的比例，反映了测序数据对基因组的覆盖程度。其解读需结合测序深度理解：（1）测序深度定义：通常以“×”表示，例如10×测序深度指平均每个基因组位置被测序reads覆盖10次，200×则为200次。（2）覆盖度与深度的关系：一般情况下，测序深…
文库产量低可能由以下原因导致：（1） DNA 质量低，样本中含抑制物（抑制酶活性等）：Input DNA制备过程中带入的高浓度金属离子、螯合剂或其他盐，可能影响末端修复及A 尾添加等步骤的反应效率，。建议DNA 在TE 溶液中进行片段化，避免在无菌超纯水中操作。（2）RNA 污染：样本中存在RNA …
文库电泳时出现条带异常，主要原因及对应解决方式如下：（1）出现小片段（60-120bp）：此类小片段通常为接头片段或接头形成的二聚体，可使用12601ES DNA磁珠进行纯化以去除；（2）文库富集后出现大片段：文库接头长度一般约120bp，若文库片段扩增幅度超过120bp可能是PCR扩增过度导致片段…
OnePot/OnePot II DNA 建库试剂盒针对基因组 DNA 和 cDNA 均可获得高产高质的文库。以下为具体应用案例及参数：（1）案例背景：客户使用逆转录获得的双链 cDNA（ds cDNA全长约 1.1kb，需酶切至 300bp 左右用于文库构建。（2）操作参数：Input DNA 量…
若使用本公司gDNA片段化产品按说明书酶切条件（20 min）酶切后仍未达到预期效果，建议优先排查以下问题：（1）DNA质量问题：Input DNA中若引入高浓度金属离子、螯合剂或其他盐离子，可能抑制酶活性。建议将 DNA稀释至ddH₂O或不含 EDTA 的10 mM Tris Buffer (（p…
在酶切反应中，即使酶切时间较短，仍可能出现过度酶切现象。例如，以300 bp 插入片段的白细胞基因组DNA（gDNA）为例，若采用30℃、10 min的酶切条件，可能会出现过度酶切现象。本产品建议在进行酶切时，需根据不同样本的基因组DNA大小调整反应条件。对于白细胞等基因组DNA相对较小的样本，应适…
酶切法建库过程中，需从多维度进行质量控制以确保文库质量，具体如下：（1）文库浓度检测：可采用Qubit荧光定量法或qPCR法，其中Qubit法通过特异性结合dsDNA的荧光染料实现浓度精准定量，qPCR 法则基于实时荧光定量原理，二者均能有效评估文库浓度； （2）文库长度检测：使用琼脂糖凝胶电泳（推…
本产品（片段化模块酶）是随机内切酶，属于单酶体系。（1）酶类型：为随机内切酶，可对DNA进行随机切割；（2）酶体系：单酶制剂；（3）应用范围：适用于DNA片段化（如用于二代测序文库构建等场景），但酶切后产生粘性末端，需后续进行末端修复。反应条件：建议初始投入量范围为500 pg 1000 ng，在3…
本试剂盒采用转座酶进行DNA 片段化，可将传统的DNA 片段化、末端修复及接头连接等繁琐步骤整合为一步酶促反应，仅需 10分钟即可完成。
12207 适用于构建以 50 ng 为起始量的 DNA 文库，13468 适用于构建以 1 ng 为起始量的 DNA 文库。两者的核心区别在于试剂盒中酶的浓度存在差异：酶浓度不匹配可能导致模板 DNA 片段化不完全或片段大小偏大，进而使最终文库与预期结果产生偏差。因此，强烈建议根据实际的 DNA …
使用本试剂盒（货号：12207）进行文库构建时，必须进行文库扩增步骤。原因在于转座反应产物并非完整的双链DNA 文库，需通过PCR 反应生成完整的DNA文库，以满足后续测序平台（如Illumina、MGI等）的建库要求。
本产品可以作用于PCR产物，但需保证PCR产物长度>500 bp。因转座酶无法作用于DNA末端，PCR产物最末端50 bp的测序覆盖度可能会有所降低。为避免末端测序覆盖度降低，推荐在制备PCR产物时将待测区域两末端各延长50-100 bp
产品12201 适用于 500 pg至500 ng的片段化DNA 样本。