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Q:40276ES观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?

叠氮化物和炔烃类间 Click 反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA 洗涤的次数。同时, 也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click 反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,还可在无 EdU 体系中进…

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Q:40276ES为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号?

请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;为确保 Click 反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化 Click 反应的有效浓度降低。所以在 Click 反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如 EDTA、EGTA…

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