不同厂家生产的预染蛋白Marker由于使用的染料种类、标记工艺或缓冲体系不同,可能导致电泳条带出现不同程度的偏移(即表观分子量与实际分子量的差异),无法达到完全一致的效果,可以参考官网的跑胶对比图。若需精确判断条带分子量,可使用非预染蛋白Marker作为对照标定,实验时请以说明书提供的参考条带位置为…
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10mg规格其体积大约3.5ml,5mg规格约1.7ml。
2.7kDa的蛋白浓度是0.16 μg/μL。
跑胶条件为140 V,120分钟。
平均每条带的蛋白浓度为0.5-1.2 μg/μL。
平均每条带的蛋白浓度为0.9-2.8ug/10ul.
不可以。因为本产品含 SDS,蛋白已变性,其分子量是在 SDS 变性体系下标定的——蛋白与 SDS 结合后自身电荷被掩盖,迁移率只取决于分子量。而天然蛋白电泳中蛋白保持天然构象和净电荷,迁移速率由分子大小、形状和电荷共同决定,同分子量的蛋白迁移位置差异很大。
预染蛋白Marker由于和染料结合,在不同电泳体系中位置是偏移的,条带位置仅供参考。 因为染料和蛋白结合后,一般都会比本来蛋白跑得更快一些的 ,我们和非预染Marker标定过的。比如有些厂家的180KD条带在Bis-Tris体系中的实际位置为140KD,而我们的180KD条带在Bis-Tris体系中…
对于5μL上样的marker,每条带平均蛋白含量约为2.5ug。
理论来说marker没有抗体结合位点,不会被显影,但是如果和目的蛋白有i相似的结合位点会被抗体识别到,进而被显影。赛默飞也有对marker显影的相关解释。这种可能性无法避免。
通常情况下,转膜后预染marker条带会更鲜亮,如果颜色变淡,可能有几种情况:(1)转印不完全操作不当,比如,转膜没有加冰袋,温度过高;胶和滤纸没夹紧。转膜条件不适合,转膜时间过长可能透膜,转膜时间过短,蛋白可能残留在胶内。膜没有充分活化,甲醇浓度太高易造成蛋白穿膜,转移到滤纸上;未活化可能也可能导…
可能使用了比较特殊的缓冲液或者洗涤强度过强。建议使用通用缓冲液,或品质有保障的商用缓冲液,适当洗涤。较小孔径的膜可以在封闭和洗涤过程中更好地保留蛋白质。
使用本产品可动态观察蛋白电泳状态和转膜效果。经 SDS-PAGE 电泳后转移到PVDF 膜、NC 膜上可见清晰的彩色条带。
不可以。因为本产品含 SDS,蛋白已变性,其分子量是在 SDS 变性体系下标定的——蛋白与 SDS 结合后自身电荷被掩盖,迁移率只取决于分子量。而天然蛋白电泳中蛋白保持天然构象和净电荷,迁移速率由分子大小、形状和电荷共同决定,同分子量的蛋白迁移位置差异很大。
使用本产品可动态观察蛋白电泳状态和转膜效果。经 SDS-PAGE 电泳后转移到PVDF 膜、NC 膜上可见清晰的彩色条带。
不可以。因为本产品含 SDS,蛋白已变性,其分子量是在 SDS 变性体系下标定的——蛋白与 SDS 结合后自身电荷被掩盖,迁移率只取决于分子量。而天然蛋白电泳中蛋白保持天然构象和净电荷,迁移速率由分子大小、形状和电荷共同决定,同分子量的蛋白迁移位置差异很大。
本缓冲液是 10 倍浓缩液,在使用前只需用去离子水稀释到 1×工作液即可。
Tris-Glycine-SDS Running Buffer 常用作蛋白质 SDS-PAGE 的电泳缓冲液。
产品结晶析出属正常现象,40 度水浴溶解即可。
配制时无需额外添加SDS。