胶原酶不会受到培养细胞所用的血清影响。
胶原酶的抑制剂有 EDTA 、EGTA 等;二是重金属离子(Hg2+,Pb2+,Cd2+);还有一些化学试剂如 Cysteine、 histidine、DTT、2-mercaptoethanol、o-phenanthroline 等,这些对胶原酶有抑制作用。
建议在 Hank’s,Earle’s 或者其他平衡盐溶液中溶解,推荐使用工作浓度 0.05 % ~0.5 % (w/v)。
(1)如果是酶活不强或钙离子不足导致,应在低温干燥条件下储存胶原酶,胶原酶溶液分装后冻存(2)如果是钙离子不足导致,应将胶原酶溶液中钙离子浓度设置为 5mM
(1)如果是蛋白酶过量,应减少蛋白酶接触时间或是加入白蛋白或灭活血清(2)如果是 pH 改变应使用缓冲液(如 HBSS);经常检查并重新调节 pH(3)如果氧气太少,应给消化液通无菌空气
如果是蛋白酶过多导致,应减少蛋白酶用量或是加入白蛋白或灭活血清
目的是为了提升酶的消化效率。
可以的,已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于 37℃继续孵育。
该冻干粉推荐使用ddH2O进行溶解。配置的储存液浓度参考浓度范围为30-100 mg/mL。
没有对CTC的测试数据。
可用于后续核酸提取、PCR等下游实验。
该试剂不含甲醛。
该试剂为无菌。
不能,这款是皂素,是相对理想的细胞破膜剂,但无法破核膜,若需破核膜还是要用 Triton-X 和Tween-20。
先固定,再破膜,再染色,需要破膜之后一起染。
是可逆的,该破膜剂为皂素。封闭液推荐使用该破膜剂配置1%的BSA,同样可以使用该破膜剂用于抗体稀释以及洗涤液。
不同批次会有差异,产品密度范围是1.125-1.135g/ml。
用一份的1.5M NaCl或者2.5M蔗糖加九份Percoll原液,得到100%的SIP溶液。在此基础上,再按照百分比使用0.15M的NaCl或者0.25M的蔗糖进行配置。
推荐使用聚碳酸酯(PC)离心管。
指的是密度,密度的不同。