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Q:40127ES胰酶消化时,胰酶不去除对细胞有影响吗?

细胞消化时,如果消化液中只有胰酶,不含 EDTA,不去除是没有问题的。如果消化液中含有胰酶和 EDTA,最好去除,EDTA 是一种化学螯合剂,能够螯合钙、镁离子, 使细胞分离。但 EDTA 不能被血清中和,消化后要彻底清洗去除。

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Q:40130ES解冻后血清中有悬浮物质/絮状沉淀,因怎样处理?

血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心10-15min…

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Q:40131ES血清融化后有细沙状的沉淀,是什么呢?

血液中的钙离子部分与磷酸结合形成磷酸钙沉淀,血清是来源于血液,血清中也有磷酸钙存在,尤其在37°C培养的时候会增加,会造成血清的浑浊,这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,并且由于布朗运动看上去像在活动,因此经常被误认为是微生物污染。磷酸钙沉淀是不影响使用的,可以1000-2000rpm,离心10m…

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Q:40131ES解冻后血清中有悬浮物质/絮状沉淀,是什么原因呢?需要怎样处理?

血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接…

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Q:40131ES血清正确的融解方式及灭活方法?

-20℃拿出血清后放置于2℃至8℃冰箱中过夜,融化过程中可以混匀几次。完全融化的血清可以放到室温恢复到室温,然后直接分装,把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多。如果是做普通的细胞培养实验不建议灭活处理,如果必须灭活处理可以56℃水浴30min处理,融化过程中摇匀几次。

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Q:40131ES血清融化后有必要灭活吗?

大多数的细胞而言是不需要灭活的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多, 这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清污染。

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