荧光探针类产品对活细胞都会有一定的毒性，因此建议在染色处理完成后应尽快完成检测和观察。
可以尝试增加染色的时间和浓度。
通常使用亲脂性花青染料，如 DiI，DiO，DiD 或 DiR。
请使用正向色谱柱； 氯仿/甲醇～10:1。
可以直接染色活的细胞或组织，对于固定的细胞或组织通常用 4%多聚甲醛进行固定使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高，或者染色效果差。
不建议通透，如果通透建议使用不含去垢剂的通透液，因为去垢剂通透液会与膜上的脂类物质反应，使荧光减弱或者影响定位增加细胞内的染色。
没有。染料是亲脂性染料，是通过插入到脂质膜中进而被激光激发观察，对于动植物细胞没有特异性 。
理论上可以，细菌有一层细胞壁，要先去除细胞壁，再染色。
DiI/DiO/DiD 和 DiR 是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散，逐渐使含有膜结构的细胞均被染色。
微丝(F-actin)探针
经4%多聚甲醛固定的细胞，虽细胞形态和结构仍可保持，但因固定剂的溶脂特性导致细胞膜的通透性发生改变，所以导致iFluor™ 647 标记鬼笔环肽可以进入到细胞对F-actin进行染色。又因未进行Triton X-100通透，所以导致部分细胞被染上。解决方法是：固定且通透。
无血清稀释细胞培养基或 PBS。
建议1h内检测 。
有利于维持细胞状态，利于后续的染色。
该探针主要染的是活细胞的内质网，固定样本基本染不上色。
活细胞的染色，不需要加抗荧光淬灭封片液。
ER-Tracker Red 按照后附的使用说明染色后，用甲醛等固定后染色效果可以被部分保留， 荧光均会有淬灭的现象的。具体的荧光维持时间这边没有数据给您参考。
建议分开依次染色，荧光均存在淬灭的现象，染色完建议尽快检测，一般 1 小时内检测荧光强度基本变化不大。
-20℃避光保存，半年有效。
LysoTracker®--不依赖 pH 的活细胞溶酶体荧光探针(40738 和 40739)； LysoSensor™--依赖 pH 的活细胞溶酶体荧光探针(40767 和 40768)。